logo

Gynækologisk udsmykning: Afkodning af analysen hos kvinder

En obligatorisk procedure, når man besøger en gynækolog, er at tage biologisk materiale til vurdering af tilstanden af ​​vaginaets mikroflora og epithelceller, livmoderens indre slimhinde, endometrium, livmoderhalscancer.

Gynækologisk udsmidning, forskning og fortolkning af disse udføres i laboratorieforhold, er meget informativ.

Analysen gør det muligt at bestemme reproduktionssystemets hormonniveau, antal og sammensætning af vaginale sekretioner, bakterieindholdet i mikroflora hos kvinder, forebygge inflammatoriske processer, identificere udviklingspatiologier, forekomst af tumorer og infektioner, der er seksuelt overførte.

Hvilke slags slag kan du tage

Sygdomme i det kvindelige reproduktive system er involveret i et specialiseret område af medicin - gynækologi.

Årsagerne til behandling af patienter er mange: At gennemføre en lægeundersøgelse til ansættelse, graviditet, smertefuld eller ubehagelig kramper i underlivet, kløe eller brænding, trøst, tung menstruation eller udledning af ukendt oprindelse.

En generel smear eller mikroskopi udføres under en rutineundersøgelse eller under graviditetsplanlægning. Resultatet er en undersøgelse af livmoderhalsen og urinrøret, skeden, hos jomfruer - endetarmen.

Papanicolaou-analysen af ​​cytologi gør det muligt at opdage papillomavirus-, precancerous epithelium- og livmoderhalsbetingelserne i tide. Det anbefales at bestå PAP-testen til alle kvinder med arvelige kræftformer, personer over 21 år.

Den bakteriologiske metode til forskning, bagposev hos kvinder, anbefales, når den inflammatoriske proces mistænkes, en krænkelse af mikroflora, som skyldes opportunistiske og patogene mikroorganismer.

PCR udføres i form af analyse for infektioner, der overføres hovedsageligt gennem seksuel kontakt. Giver fuldstændig information om bakteriens sammensætning af den interne mikroflora.

Effektiviteten og pålideligheden af ​​metoden er 98%.

Forberedelse til smeden

Før en ordinær eksamen pålægges, er en gynækolog eller en laboratoriemedarbejder forpligtet til at advare patienten om, hvordan man korrekt smeder for flora, hvilket kan og ikke kan gøres før proceduren.

Forberedelse til mikroskopisk undersøgelse giver mulighed for afvisning af potente antibiotika 2 uger før den påtænkte analyse, hvor man besøger badeværelset dagen før. Du bør prøve ikke at gå på toilettet 2 timer før analysen.

Diagnose udføres bedst ikke før, men under menstruation og i de første to dage efter.

For at øge følsomheden af ​​testen udføres bacperi på mikroflora i fravær af behandling med antibakterielle lægemidler og udtørring. Sørg for at overholde en særlig diæt i 2-3 dage før bakteriologisk analyse: Begræns fødevarer, der fremkalder gæring eller intestinal oprør.

Afstå fra samleje med en partner og vask ikke i 24 timer før dataindsamling.

3-5 dage før den foreskrevne PCR-diagnose er det forbudt at tage antibakterielle og antikonceptive midler. I 36 timer er det nødvendigt at udelukke køn. Det er ønskeligt for dagen før PCR og på tærsklen for at tage analysen ikke at gå ind i bruseren. Materialet tages under menstruation og i 1-2 dage efter færdiggørelsen.

Hvordan man smeder fra kvinder

Teknikken til at tage materiale udføres normalt om morgenen i gynækologisk afdeling eller direkte i laboratoriet selv. At tage vaginale sekretioner og forskningsområder er kun tildelt kvinder, der har sex. Hos piger tages den mere forsigtigt ud fra den laterale vaginale fornix for at eliminere skader på hymen og tarmene, sekretionerne.

Alle manipulationer forekommer på den gynækologiske stol. På dette tidspunkt introducerer specialisten et specielt spejl afhængigt af patientens alder og fysiologiske egenskaber. Hvis organerne endnu ikke er dannet, anvendes XS-størrelsen, pigerne vil have brug for et spejl S. Efter arbejdsaktiviteten anvendes undersøgelsesværktøjer med en diameter på 25-30 mm og størrelse M, L.

Indsamlingen af ​​materiale udføres med en spatel eller en spatel, en børste, påføres på en glasskinne eller anbringes i et reagensglas for yderligere overførsel af de opnåede resultater til laboratoriet.

Smøre på mikroflora: dekodning

Uafhængigt af at konkludere, hvor godt eller dårligt udtværning er, er det umuligt uden passende viden. Brug af specielle symboler til at tyde den mikroskopiske undersøgelse af et smear er meget enkel. Afhængig af placeringen af ​​det taget biologiske materiale skelnes der mellem: Vagina - "V", cervix - "C" og urinrør - "U".

Gram-positive sticks, "Gr. +" Og fraværet af coccal flora. Resultatet er "++++". Det observeres ganske sjældent, oftest resultatet af intensiv antibiotikabehandling. Norm: "++", "+++" sticks, antallet af cocci overstiger ikke "++".

Gram-negative bakterie gonokokker - "Gn", Trichomonas vaginal - "Trich", gær af slægten "Candida". Tilsvarende sygdomme som gonoré, trichomoniasis og candidiasis.

Tilstedeværelsen af ​​nøgleceller og Escherichia coli, hvis de er angivet i mikrofloraens sammensætning, antyder, at patienten har bakteriel vaginose.

Smøre på floraen: normen hos kvinder

Alle patienter, uden undtagelse, fra 14 år til menopausens begyndelse, svarer til samme norm opnået som følge af laboratoriemikroskopisk undersøgelse.

Leukocytter. Beskytter kroppen mod penetrerende vira, bakterier og infektioner, det kan være i synsfeltet, men bør ikke overskride indikatoren i skeden - 10 i livmoderhalsen - 30, urinrør - 5.

Epitel. En moderat mængde epitelvæv er normen. Et stort tal angiver mulig inflammation, og for lavt indikerer utilstrækkelig produktion af hormonet østrogen.

Slime. En lille mængde eller mangel deraf er tilladt. Den maksimale daglige udledning af kirtlerne i livmoderhalskanalen er 5 ml.

Gram-positive pinde, "Gr. +". Skal være til stede lactobacilli og stokke af Doderlein i store mængder. De er ansvarlige for kroppens immunrespons på fremmedlegemer. I livmoderhalsen og deres urinrør bør ikke være.

"Gr.-", gram-negative, anaerobe stave er ikke defineret.

Gonokokker med symbolet "gn", trichomonads, chlamydia, nøgle og abnormale celler, svampe, gær, Candida er fraværende. Hvis de findes i resultaterne, får patienten en yderligere undersøgelse for gonoré, trichomoniasis, chlamydia, bakteriel vaginose, thrush.

Smøre på graden af ​​renhed

For at undgå komplikationer under drægtigheden rådes gravide kvinder til at bestemme graden af ​​renhed i det gynækologiske smear. Normalt er den vaginale mikroflora hos en sund kvinde 95-98% Bacillus vaginalis eller Doderlein lactobacillus bakterier. De producerer mælkesyre, som hjælper med at bevare surhedsgraden.

Patogene og betinget patogene mikroorganismer kan ikke overleve under sådanne forhold. Men under indflydelse af forskellige faktorer, såsom seksuel aktivitet, overgangsalder, menstruationscyklus og nedsat immunitet, kan mikrofloraindikatorer ændres.

  • 1 grad af renhed af vagina er normalt pH 3,8-4,5. Onsdag er sur Leukocytter og epithelceller - ikke mere end 10.
  • 2 grader. Lavt sure miljø: pH = 4,5-5. Der er en lille stigning i gram-positive cocci, Candida svampe.
  • 3 grader. Patogene mikroorganismer aktiveres, slim fremstår, epitheliumindikatorer overstiger normen. Neutralt surhedsgrad, pH = 5-7. Leukocytter over 10. Slim, nøgleceller er til stede, gram-negative og gram-positive mikroorganismer formeres i gunstige betingelser for mikroflora.
  • I sidste ende er 4 grader renheden lav. PH-værdier når 7,5. Doderleyn stikker eller mangler eller er i en enkelt mængde. Skeden er fyldt med patogener.

Bakteriologisk undersøgelse

Kompositionens mangfoldighed ud over lactacacuspindene af Doderlein, som er en integreret del af mikrofloraen i den undersøgte kvindes vagina, begynder ikke at blive undersøgt med det samme. Såning på et specielt skabt gunstigt miljø af det indsamlede biologiske materiale til dets efterfølgende vækst tager tid og udvikling og udvikling.

Bakteriologisk plantning af floraen kan vurderes gennem et mikroskop, der er genstand for en stigning i antallet af mikrobielle repræsentanter.

  • 0 klasse. Observeret med antibiotikabehandling. Patogenet er fraværende.
  • Jeg klasse. Antallet af bakterier øges ikke eller moderat vækst.
  • II klasse. Blandet natur af mikroflora. Op til 10 kolonier af bakterier Gardnerella vaginalis eller Mobiluncus, patogener af gardnerella detekteres.
  • III klasse. Der er omkring 100 kolonier. For det meste er mikroflora beboet af Gardnerella og Mobiluncus. Symptomer på bakteriel vaginose forekommer.
  • IV klasse. Lactobacilli er fraværende, immuniteten svækkes. Diagnosen af ​​erhvervet infektionssygdom er aerob vaginitis.

Cytologisk undersøgelse

Sandsynligheden for at detektere pletter af ændret epithelium, papillomavirus og onkologiske neoplasmer er ret højt efter 30 år, begyndelsen af ​​seksuel aktivitet.

Derfor anbefaler gynækologer at tage et smør for cytologi eller PAP test. Udgangsmaterialet til cytologisk undersøgelse er: cervixkanalen, den vaginale del af livmoderhalsen.

Korrekt fortolkning af PAP-testen afhænger af tilstedeværelsen eller fraværet af kræftformige, atypiske celler.

  • NILM. Det kliniske billede uden funktioner, CBO. Leukocytter og bakterier udskilles i små mængder. Mulig primær candidiasis eller bakteriel vaginose. Epitellaget er normalt.
  • ASC-US. Fundet atypiske områder i epitelvæv af ukendt oprindelse. Gentagen analyse udføres efter 6 måneder til søgning efter chlamydia, dysplasi, humant papillomavirus.
  • LSIL. For at bekræfte den precancerøse tilstand forårsaget af atypiske celler, er biopsi og colposkopi foreskrevet. Mild tegn på epitelændringer.
  • ASC-H. Udtales læsion af flade epithelium. Hos 1% af patienterne diagnosticeret med den første fase af livmoderhalskræft har de resterende 98-99% grad 2-3 dysplasi.
  • HSIL. Samtidige symptomer, der gik forud for carcinom i pladeepitelet, livmoderhalsen, blev fundet hos mere end 7% af de undersøgte kvinder. 2% har kræft.
  • AGC. Atypisk tilstand af glandular epithelium. Diagnose: cervikal eller endometrial cancer, avanceret form for dysplasi.
  • AIS. Skævtcellercarcinom, livmoderhalskræft.

PCR-analyse

Den molekylære følsomhed ved PCR-diagnostikmetoden er yderst følsom og pålidelig. Takket være oprettelsen af ​​tidligere prøver af det isolerede og kopierede DNA finder en sammenligning med det opnåede biologiske materiale sted.

Analyse for infektion ved hjælp af PCR gør det muligt på kort tid at finde årsagsmidlet for sygdommen hos de kvindelige kønsorganer ved at opnå et positivt eller negativt resultat.

Polymerasekædereaktion letter bestemmelsen af ​​chlamydia, ureaplasmose, thrush, trichomoniasis, HPV, HIV, søgen efter årsagerne til svær graviditet og hormonelle lidelser.

Ulemperne ved PCR er tilfælde af falske data i tilfælde af ukorrekte test, mulig mutation af patogenens DNA.

Analyser> Mikroskopisk (bakterioskopisk) undersøgelse af et Gram-farvet smear i diagnosen infektiøse og inflammatoriske processer

Oplysningerne er kun indsendt på hjemmesiden. Sørg for at konsultere en specialist.
Hvis du finder en fejl i teksten, fejlagtig tilbagemelding eller forkerte oplysninger i beskrivelsen, bedes du venligst informere webstedsadministratoren om dette.

Anmeldelser udgivet på dette websted er de personlige meninger af de personer, der skrev dem. Må ikke selvmedicinere!

Detaljeret transkriptanalyse af smear for flora hos kvinder

Smøreanalysen for flora er en af ​​de vigtigste diagnostiske metoder i gynækologi. Et smear er taget fra vaginal slimhinden, livmoderhalsen eller urinrøret. Denne analyse gør det muligt at vurdere tilstanden af ​​mikrofloraen i det urogenitale system og at identificere tilstedeværelsen af ​​patogene mikroorganismer.

Analyse af smear for flora hos kvinder udføres under en rutinemæssig undersøgelse foretaget af en gynækolog og hvis der er klager fra urinsystemet. Disse omfatter: smerter i underlivet, kløe, brændende i vagina, udledning, hvilket indikerer en mulig inflammatorisk proces. Denne analyse er også ønskelig at gøre ved afslutningen af ​​et kursus af antibiotikabehandling til forebyggelse af thrush og ved planlægning af graviditet.

Hvad er denne analyse tildelt?

Et vaginal smear er normalt en del af en rutinemæssig medicinsk checkup for kvinder. Det udføres af en specialist under en gynækologisk undersøgelse. Derudover samles biologisk materiale fra urinrøret og livmoderhalsen.

Denne diagnose giver dig mulighed for at opdage mulige problemer med kvinders sundhed, såsom en inflammatorisk proces eller en sygdom forårsaget af en infektion. I medicinsk terminologi har en sådan undersøgelse et andet navn - bakterioskopi.

En gynækologisk udtværing tages, hvis du har mistanke om sådanne sygdomme:

Eksperter kan ordinere et smear med følgende patientklager:

Smøring tages under planlægning af graviditet og efter antibiotikabehandling. Derudover giver et smør dig mulighed for at overvåge effektiviteten af ​​terapi til behandling af gynækologiske sygdomme.

Undersøgelsen hjælper også med at identificere humant papillomavirusinfektion.

  • Smertefri procedure.
  • Enkle regler for forberedelse til smøring.
  • Overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen af ​​kvindelige sygdomme.
  • Evnen til at bestemme en række sygdomme i det genitourinære system.

Med det forebyggende formål skal kvinder regelmæssigt udføre denne diagnose. Dette vil medvirke til at forhindre mulige uønskede virkninger.

Forberedelse til levering

Nogle læger siger, at denne analyse ikke kræver særlig træning, men det er det ikke. For pålideligheden af ​​resultaterne anbefales det, at patienten ikke går på toilettet i 2-3 timer, da urinen kan vaske alle patogene bakterier og infektioner ud, vil det være vanskeligt for den behandlende læge at bestemme årsagerne til din patologiske tilstand.

Douching, vaginale suppositorier og antibakteriel sæbe bidrager også til upålidelige indikatorer. Kvinder skal aflevere denne analyse efter menstruationens afslutning, og desuden skal alle patienter afholde sig fra samleje 2 dage før de tager biomaterialet.

Hvordan giver man op?

Analysen tages oftest af lægen, når du kommer til ham regelmæssigt på klinikken, eller når du bare går til et betalt laboratorium, hvor fødselslæger og medicinsk personale tager et biomateriale fra dig.

En gynækolog, en fødselslæge eller en anden medicinsk professionel har let en speciel engangspatel i form af en pind på tre punkter - vagina, urinrøret og livmoderhalsen.

Hos mænd indlægger urologen eller en anden læge en speciel engangssonde i urinrøret, drejer sig om flere gange rundt om akse og tager en analyse. Det antages, at undersøgelsen ikke giver smerte, men dette udelukker ikke lægenes uforsigtighed, såvel som individuel følsomhed eller tilstedeværelsen af ​​en bestemt sygdom, som kan forårsage ubehag.

Betydningen af ​​bogstaverne på analysebladet

Læger bruger ikke fulde navne, men forkortelser - de første bogstaver i hver af analyseparametrene. For at forstå den normale mikroflora i skeden er meget nyttig viden om bogstaver symboler.

Så hvad er disse bogstaver:

  1. Forkortelserne af de zoner, hvorfra materialet er taget, betegnes som V (vagina), C (cervikal cervikal område) og U (urinrør eller urinationskanal);
  2. L-leukocytter, hvis størrelse ikke falder sammen under normale og patologiske forhold;
  3. Ep-epithelium eller Pl.ep-epithelium er fladt;
  4. GN-gonococcus ("gudslid" af gonoré);
  5. Trich - Trichomonas (patogener af trichomoniasis).

I et smear er det muligt at opdage slim, der indikerer et normalt internt miljø (PH), nyttige Doderlein-pinde (eller lactobaciller), hvis værdi er lig med 95% af alle fordelagtige bakterier.

Nogle laboratorier gør det til en regel at sætte mærker på indholdet af en bestemt type bakterier. F.eks. Bruges et eller andet sted til dette tegn "+". Det er sat i 4 kategorier, hvor ét plus er ubetydeligt indhold, og den maksimale værdi (4 plus) svarer til deres overflod.

I mangel af nogen flora i smeden er forkortelsen "abs" anbragt (latin, der er ingen denne type flora).

Hvad kan lægerne ikke se med mikroskopi?

Med denne analyse er det umuligt at bestemme sådanne lidelser eller sygdomme i kroppen:

1) Kræft i livmoderen og livmoderhalsen. For at diagnosticere en malign degeneration af endometriumet er histologisk materiale nødvendigt og i store mængder. Og tag det direkte fra livmoderen med separat diagnostisk curettage.

2) Graviditet. For at bestemme det er det ikke nødvendigt at smøre og uanset hvilket resultat det vil vise. Du skal bestå en blodprøve for hCG, undergå en gynækologisk undersøgelse af en læge eller en ultralyd af livmoderen. Du kan identificere chorionisk gonadotropin i urinen, men ikke i decharge fra kønsorganerne!

3) livmoderhalskræft og andre patologier (erosion, leukoplaki, coilocytose, HPV-skader, atypiske celler osv.) Er baseret på resultaterne af cytologisk undersøgelse. Denne analyse tages direkte fra livmoderhalsen, fra transformationszonen, ifølge en specifik metode med Papanicolaou-farvning (dermed navnet på analysen - PAP-testen). Det kaldes også oncocytology.

4) Viser ikke sådanne infektioner (STD) som:

De første fire infektioner diagnosticeres af PCR. Og for at bestemme tilstedeværelsen af ​​immunbristviruset ved smøring med høj nøjagtighed er det umuligt. Du skal bestå en blodprøve.

Norms smear på flora

Efter at have modtaget analyseresultaterne, er det nogle gange svært at forstå de tal og bogstaver, som lægen har skrevet. Faktisk er alt ikke så svært. For at forstå, om du har gynækologiske sygdomme, skal du kende de normale værdier, når du afkryderer smøret for floraanalyse. De er få.

Ved smørprøver i en voksen kvinde er de normale værdier som følger:

  1. Phlegm - skal være til stede, men kun i små mængder.
  2. Leukocytter (L) - Tilstedeværelsen af ​​disse celler er tilladt, da de hjælper med at bekæmpe infektionen. Det normale antal leukocytter i skeden og urinrøret er ikke mere end ti, og i livmoderhalsen - op til tredive.
  3. Flad epithelium (pl. Ep) - normalt skal nummeret være inden for femten celler i syne. Hvis tallet er større, så er det tegn på inflammatoriske sygdomme. Hvis mindre - et tegn på hormonelle lidelser.
  4. Dederleyn-pinde - en sund kvinde skal have mange af dem. En lille mængde lactobaciller taler om nedsat vaginal mikroflora.

Tilstedeværelsen i analysen af ​​svampe af slægten Candida, småpinde, gram (-) cocci, trichomonader, gonokokker og andre mikroorganismer indikerer forekomsten af ​​sygdommen og kræver mere dybtgående forsknings- og behandlingsrecept.

Tabel over afkodningsstandarder smør hos kvinder (flora)

Dekryptering af resultaterne af smearanalyse for flora hos kvinder fremgår af nedenstående tabel:

Graden af ​​renhed af smear på floraen

Afhængigt af resultaterne af smeden er der 4 grader af renhed af vagina. Graden af ​​renhed afspejler tilstanden af ​​den vaginale mikroflora.

  1. Første renhedsgrad: Antallet af leukocytter er normalt. Det meste af den vaginale mikroflora er repræsenteret af lactobaciller (Doderlein-pinde, laktomorfotyper). Mængden af ​​epitel er moderat. Slim er moderat. Den første grad af renhed siger, at alt er normalt med dig: mikrofloraen er i orden, immuniteten er god, og betændelsen truer dig ikke.
  2. Den anden grad af renhed: Antallet af leukocytter er normalt. Vaginaens mikroflora er repræsenteret af gavnlige mælkesyrebakterier på lige fod med coccalflora eller gær. Mængden af ​​epitel er moderat. Mængden af ​​slim er moderat. Den anden grad af renhed i skeden henviser også til normen. Sammensætningen af ​​mikrofloraen er imidlertid ikke længere perfekt, hvilket betyder, at lokal immunitet reduceres, og der er en højere risiko for betændelse i fremtiden.
  3. Den tredje grad af renhed: Antallet af leukocytter over normen. Hovedparten af ​​mikrofloraen er repræsenteret af patogene bakterier (kokker, gær svampe), antallet af mælkesyrebakterier er minimal. Epitel og slim er mange. Den tredje grad af renhed er en betændelse, som skal behandles.
  4. Den fjerde grad af renhed: Antallet af leukocytter er meget stort (hele synsfeltet, helt). Et stort antal patogene bakterier, fraværet af lactobaciller. Epitel og slim er mange. Den fjerde grad af renhed indikerer udtalt inflammation, der kræver øjeblikkelig behandling.

Den første og anden grad af renhed er normale og kræver ikke behandling. Gynækologiske manipulationer (livmoderhalsbiopsi, livmoderhvirvel, genopbygning af hymen, hysterosalpingografi, forskellige operationer mv) er tilladt i disse grader.

Den tredje og fjerde grad af renhed er betændelse. I disse grader er alle gynækologiske manipulationer kontraindiceret. Du skal først behandle betændelsen og derefter vende smeden igen.

Hvad er coccal flora i et smear?

Cocci er sfæriske bakterier. De kan forekomme både under normale forhold og i en række inflammatoriske sygdomme. Normalt findes en enkelt kokos i smeden. Hvis immunforsvaret falder, øges mængden af ​​coccobacilli flora i smøret. Cocci er positive, (gr +) og negative (gr-). Hvad er forskellen mellem gr + og gr-cocci?

For en detaljeret beskrivelse af bakterier skal mikrobiologerne, ud over at specificere bakteriens form, størrelse og andre egenskaber, male præparatet efter en særlig metode kaldet "Gram stain". Mikroorganismer, som forbliver farvede efter vask af et smear, betragtes som "gram-positive" eller cr +, og som er misfarvede, når de vaskes, er "gram-negative" eller c-. For gram-positive indbefatter for eksempel streptokokker, stafylokokker, enterokokker og lactobaciller. Til gram-negative cocci tilhører gonokokker, E. coli, Proteus.

Hvad er Doderlein-pinde?

Doderlein sticks eller, som de også kaldes, lactobacilli og lactobacilli er mikroorganismer, der beskytter vagina mod patogene infektioner ved at producere mælkesyre, som hjælper med at opretholde et surt miljø og ødelægge den patogene flora.

Reduktion af antallet af lactobaciller indikerer en forstyrret syre-base balance af mikroflora i vagina og skift den til den alkaliske side, hvilket ofte forekommer hos kvinder med aktivt sexliv. På vagens pH og patogene mikroorganismer har en signifikant virkning, og opportunistisk (som nogle gange findes i vagina er normalt).

Smør på flora under graviditet

Hver kvindes mikroflora er strengt individuel og består normalt af 95% mælkesyrebakterier, der producerer mælkesyre og opretholder en konstant pH i det indre miljø. Men i vagina er til stede i normen og opportunistisk flora. Det fik navnet, fordi det kun bliver patogen under visse betingelser.

Dette betyder, at selvom det sure miljø er til stede i vagina, forårsager den betingelsesmæssigt patogene flora ingen besvær og reproduceres ikke aktivt. Disse omfatter gærlignende svampe, som under visse omstændigheder kan forårsage vaginal candidiasis, såvel som gardnerella, stafylokokker, streptokokker, som under andre forhold kan få en kvinde til at have bakteriel vaginose (inflammatorisk proces).

En kvindes flora kan ændres af forskellige årsager - med et fald i immunitet, antibiotika, med almindelige smitsomme sygdomme og diabetes. En af disse faktorer, som kan ændre mikrofloraen, er en ændring i hormonniveauet. Således producerer en gravid kvinde ikke østrogener til graviditeten, men hormonprogesteron produceres i store mængder. Dette hormonelle niveau gør det muligt for Doderleins pinde at stige 10 gange, så kroppen forsøger at beskytte fostret mod mulig infektion under graviditeten. Derfor er det meget vigtigt, før den planlagte graviditet undersøges og for at bestemme graden af ​​renhed af vagina. Hvis dette ikke er gjort, kan der under graviditeten aktiveres opportunistisk flora og forårsage forskellige sygdomme i vagina.

Candidiasis, bakteriel vaginose, gardnerellosis, gonoré, trichomoniasis - dette er langt fra en komplet liste over sygdomme, der svækker og løsner væggene i skeden. Dette er farligt, fordi under fødslen kan bryde op, hvilket ikke kunne være, hvis vagina var ren og sund. Sygdomme som mycoplasmosis, chlamydia og ureaplasmosis opdages ikke ved smear-analyse, og disse patogene mikroorganismer kan kun påvises ved blodanalyse ved anvendelse af PCR (polymerasekædereaktion) ved hjælp af specielle markører.

Smerteanalysen af ​​en gravid kvinde tages ved registreringstidspunktet og derefter til overvågning i perioden 30 og 38 uger. Normalt, for at vurdere tilstanden af ​​den vaginale mikroflora, taler lægerne om den såkaldte renhed af vagina, som en kvinde bør vide og sikre, at den nødvendige grad opretholdes under graviditeten.

Smøre på kvindens flora: hvad bestemmer det, hastigheden og patologien

Smøre på flora - ofte udpeget af gynækologer analyse. Hvad viser han og hvilke misforståelser der findes på hans konto?

Denne analyse kan kaldes "generel". Dette er den primære diagnose, som gør det muligt for lægen at bekræfte eller benægte tilstedeværelsen af ​​den inflammatoriske proces i vagina, urinrør, livmoderhalskanal og også at drage visse konklusioner om mulige overgangsalder eller klimakteriske ændringer i patienten.

  • Mikroskopisk (bakterioskopisk) Gramfarvet smear er det officielle navn;
  • et udseende fra kønsorganerne
  • bacterioscopy;
  • Mikroskopi.

Bruges til at diagnosticere infektiøse og inflammatoriske processer. Bakterioskopi giver dig mulighed for at opdage bakterier i kvindens kønsorganer: de enkleste mikroorganismer - gonokokker, der fremkalder gonoré, trichomonas - det forårsagende middel til trichomoniasis. En specialist i mikroskopet vil også se nogle bakterier, svampe (Candida), nøgleceller (et tegn på bakteriel vaginose). Typen af ​​mikroorganisme bestemmes af dens form, størrelse og også om den er farvet med et farvestof eller ej, det vil sige, er gram-positiv eller gram-negativ.

Derudover beregnes antallet af leukocytter i synsfeltet i en udstrygning fra hvert punkt (taget fra vagina, urinrør, cervikal kanal). Jo flere af dem - jo mere udtalte den inflammatoriske proces. Anslået mængde af epithel og slim. Flad epithelium er især rigeligt hos kvinder i reproduktiv alder i løbet af ægløsning - midt i menstruationscyklussen.

  • vaginal candidiasis (thrush);
  • bakteriel vaginose (tidligere kaldet gardnerellosis);
  • gonorré;
  • trichomoniasis.

Hvis der ikke er tydelige tegn på en af ​​disse sygdomme, men et udtvær er dårligt udføres der en grundig undersøgelse af materialet - bagvand udføres.

Grunde til at udføre såning i gynækologi

  1. Hvis der er et moderat eller stort antal leukocytter i et smear, men infektionsårsagsmidlet er ikke kendt. Siden mikroskopi er der en nedre grænse for detektion af mikroorganismer: 10 til 4 - 10 til 5 grader.
  2. Hvis der opdages en mikrobe for at bestemme dens følsomhed overfor antibiotika.
  3. Hvis der er tegn på svampeinfektion. For nøjagtigt at bestemme typen af ​​svampe og foreskrive et effektivt antimykotisk lægemiddel.

Andre former for svampe Candida kan ikke behandles, hvis der ikke er patologiske symptomer.

Hvis nøgleceller findes (tegn på bakteriel vaginose), men også andre mikrober er til stede. Til identifikation.

Hvad er forskellene mellem backwater, udtværing på flora og vagens grad af renhed?

I forskningsmetoden. Med et generelt smear er materialet deponeret på et stykke glas farvet med specielle farvestoffer og set under et mikroskop. Og når bakteriologisk (bacpericulture, kultur, mikrobiologisk) forskning er færdig, bliver den først "sået" på et næringsmedium. Og så ser de efter et par dage under et mikroskop - hvilke mikroorganismer kolonier er vokset.

Det vil sige, hvis vi taler om eksplosionsanalyse, vil du kun få en mening om antallet af leukocytter, epithel og slim. Såning er ikke akut

Også med mikroskopi kan du hurtigt bestemme graden af ​​renhed fra vagina. Her vurderer lægen kun forholdet mellem normal, betinget patogen og patogen mikroflora.

Klassisk vurdering af skedenes renhed.

Hvilke læger kan man ikke se med mikroskopi

  1. Graviditet. For at bestemme det er det ikke nødvendigt at smøre og uanset hvilket resultat det vil vise. Du skal bestå en blodprøve for hCG, undergå en gynækologisk undersøgelse af en læge eller en ultralyd af livmoderen. Du kan identificere chorionisk gonadotropin i urinen, men ikke i decharge fra kønsorganerne!
  2. Kræft i livmoderen og livmoderhalsen. For at diagnosticere en malign degeneration af endometriumet er histologisk materiale nødvendigt og i store mængder. Og tag det direkte fra livmoderen med separat diagnostisk curettage.

Cervikal cancer og andre patologier (erosion, leukoplaki, koilocytose, HPV-skade, atypiske celler osv.) Er baseret på resultaterne af en cytologisk undersøgelse. Denne analyse tages direkte fra livmoderhalsen, fra transformationszonen, ifølge en specifik metode med Papanicolaou-farvning (dermed navnet på analysen - PAP-testen). Det kaldes også oncocytology.

  • Viser ikke sådanne infektioner (zppp) som:
    • herpes;
    • chlamydia (chlamydia);
    • mycoplasmer (mycoplasmosis);
    • ureaplasma (ureaplasmose);
    • HIV.
  • De første fire infektioner diagnosticeres af PCR. Og for at bestemme tilstedeværelsen af ​​immunbristviruset ved smøring med høj nøjagtighed er det umuligt. Du skal bestå en blodprøve.

    Sådan forbereder du dig til analysen og når det er nødvendigt

    En læge tager et smør fra en patient på en gynækologisk stol (uanset om hun er gravid eller ej) ved hjælp af en speciel børste eller Volkmanns sterile ske. Det gør ikke ondt overhovedet og meget hurtigt.

    Det er teknisk muligt at opnå et godt, jævnligt perfekt smear, hvis du saniterer din vagina med f.eks. Chlorhexidin eller miramistin. Men hvad er pointen?

    • douche;
    • have sex
    • Brug vaginale hygiejneprodukter, intime deodoranter og lægemidler, hvis de ikke er ordineret af en læge.
    • gøre en ultralyd ved hjælp af en vaginal sonde;
    • gennemgå kolposkopi.
    • før du besøger en gynækolog eller et laboratorium i 3 timer, bør du ikke urinere.

    Donering slagtilfælde kræver menstruation blødning. Selv om der kun er en "daub" på menstruations sidste dag, er det bedre at udsætte studiet, da resultatet sandsynligvis vil være dårligt - et stort antal hvide blodlegemer vil blive afsløret.

    Hvad angår alkoholindtag er det ikke forbudt.

    Kan jeg tage et smør, mens jeg tager antibiotika eller umiddelbart efter behandling? Det er uønsket at gøre dette inden for 10 dage efter anvendelse af lægemidler (vaginal) og en måned efter at have taget antibakterielle midler oralt.

    Mikroskopisk undersøgelse foreskrevet:

    • rutinemæssigt når man besøger en gynækolog
    • ved adgang til det gynækologiske hospital
    • før IVF;
    • under graviditet (især hvis et smear ofte er dårligt);
    • hvis der er klager: usædvanlig udledning, kløe, bækken smerter mv

    Fortolkning af resultaterne: hvad skal man overveje normen og hvad - patologi i mikrofloraen

    Til at begynde med bringer vi opmærksom på et bord, hvor indikatorerne for den såkaldte første grad af renhed vises. Der er ingen omtale af urinrøret i det (selv om materialet også er taget derfra), da vi taler om gynækologiske sygdomme. Den inflammatoriske proces i urinrøret behandles af en urolog.

    Epitel - Antallet af epitelceller tælles ikke, da det ikke har nogen diagnostisk værdi. Men for lidt af epitelet taler om en atrofisk type smear - det sker hos kvinder i overgangsalderen.

    Leukocytter - anses for at være i synsfeltet:

    • ikke mere end 10 - en lille mængde;
    • 10-15 - moderat beløb;
    • 30-50 - et stort antal, kvinden opdager de patologiske symptomer, og lægen under undersøgelsen diagnosticerer den inflammatoriske proces i skeden og (eller) på livmoderhalsen.

    Slim (slimhinde) - normalt bør være til stede, men et stort antal sker med betændelse. I urinrøret bør slim ikke være.

    Bakteriel flora eller gr lactomorphotypes - normen, det er beskyttelsen af ​​vagina fra bakterier.

    Trichomonas, gonokokker og nøgleceller i en sund kvinde i livmoderhalsen og vagina bør ikke være. Candida er også fraværende. I det mindste i en betydelig mængde, som detekteres i analysen af ​​flora.

    Egnethed er ikke stort. Men hvis en kvinde går ind på hospitalet, så tager de friske fra hende lige der under den første undersøgelse i stolen.

    Normalt er resultaterne gyldige 7-14 dage. Derfor skal du gøre det 3 dage før adgang til hospitalet, hvis du skal overføre det før operationen. Den sidste af de tildelte prøver.

    Hvad findes i bacposseve

    Gynækologen vil kunne dechiffrere resultatet af den kulturelle forskning bedst af alt. Men du selv, hvis du læser oplysningerne nedenfor, skal du forsigtigt finde ud af din analyse.

    Antallet af mikroorganismer kan udtrykkes ved "krydsninger":

    • "+" Er en lille mængde;
    • "++" er et moderat beløb;
    • "+++" er et stort antal;
    • "++++" - rigelig flora.

    Men oftere er antallet af mikroflora repræsentanter udtrykt i grader. For eksempel: Klebsiella: 10 til 4 grader. Af den måde er dette en af ​​repræsentanterne for enterobakterier. Gram-negativ stav, aerob mikroorganisme. Et af de farligste patogener, selvom det kun er opportunistisk. Dette skyldes, at Klebsiella er resistent (resistent) mod de fleste antibakterielle midler.

    Nedenfor beskriver vi andre fælles termer, der findes i resultaterne af en undersøgelse, eller du kan høre fra en læge.

    Soor - er candida eller på anden måde - thrush. Det behandles med antimykotiske (antifungale) lægemidler.

    Gærlignende svampebastosporer og pseudomycelium - candidiasis eller anden svampesygdom, som normalt behandles på samme måde som trussel.

    Difteroider - betinget patogene mikroorganismer, ifølge resultaterne af forskningen fra forskere, er de i de fleste kvinder ca. 10% af mikrofloraen, såvel som streptokokker, stafylokokker, E. coli, gardnerella. Hvis flora er forstyrret, stiger deres antal.

    Leptotrix er en anaerob gram-negativ bakterie, der forårsager leptotrichose. Læs mere om det i denne artikel.

    Blandet flora er en variant af normen, hvis der ikke er symptomer på sygdommen, helt leukocytter eller deres stærke stigning (40-60-100). 15-20 er en variant af normen, især under graviditeten.

    Enterokokker (Enterococcus) er repræsentanter for den intestinale mikroflora, som undertiden kommer ind i vagina. Gram positive cocci. Om enterococcus fecalis (Enterococcus faecalis) skrev vi tidligere. Der er også enterococcus coli - E. coli. Forårsager normalt ubehagelige symptomer ved en koncentration på over 10 i 4 grader.

    Pseudomonas aeruginosa er en gram-negativ bakterie. Ofte påvirker mennesker med lav immunitet. Det har god resistens mod antibiotika, hvilket komplicerer behandlingsprocessen.

    Polymorf bacillus er en fælles repræsentant for den vaginale biocenose. Hvis antallet af leukocytter er normalt og der ikke er nogen klager, bør dets tilstedeværelse ikke forstyrre.

    Erythrocytter - kan være i små mængder i smear, især hvis det blev taget under den inflammatoriske proces eller når der var en lille spotting.

    Coccus eller coccobacterial flora - normalt under en infektiøs proces i vagina eller på livmoderhalsen. Hvis en kvinde har klager, kræves antibakteriel behandling - vaginal debridement.

    Diplococci er en type bakterier (cocci). I en lille mængde bringe ikke skade. Med undtagelse af gonokokkov - patogener gonoré. Hun bliver altid behandlet.

    Og i konklusion vil vi citere hyppige forkortelser, der er skrevet på blanket af analyseresultaterne:

    • L-leukocytter;
    • Ep - epitel;
    • Pl. ep. - pladepitel
    • Gn (gn) -monokokker, det forårsagende middel af gonoré;
    • Trich - trichomonas, det forårsagende middel af trichomoniasis.

    Mikroskopisk undersøgelse af et smear fra en vagina med Gram-plet (vurderet af Nugent-skalaen)

    Swabs bør ikke tages:

    • under menstruation
    • tidligere end 5 dage efter anvendelse af vaginale suppositorier, tamponer eller spermicider;
    • efter vaginal undersøgelse (bækken ultralyd, colposcopy), douching;
    • tidligere 24-48 timer efter samleje.

    Forskningsmetode: Mikroskopi

    Bakterioskopi af et Gram-farvet vaginal smear er "guldstandarden" til diagnosticering af bakteriel vaginose. Diagnose af bakteriel vaginose er baseret på tilstedeværelsen eller fraværet af følgende symptomer:

    • fald i antallet eller forsvinden af ​​laktobaciller - grampositive stænger af forskellig længde og tykkelse;
    • en stigning i antallet af gramvariable (blandet) cocco-bacilli mikroflora;
    • tilstedeværelsen af ​​nøgleceller, som er overfladiske celler i det vaginale epitel med bakterier klæbet til dem, på grund af hvilke epithelcellen har et granulært udseende, og kanterne af sådanne celler ser fuzzy ud.

    For at vurdere resultaterne af undersøgelsen af ​​lægemidler, der er afledt af den aftagelige vagina og Gram-farvede, skal du bruge standard ti-punkts skalaen (Nugents kriterier). Grundlaget er et system af punkter (point) fra 0 til 4 og deres kombination til diagnosticering og vurdering af graden af ​​bakteriel vaginose ifølge vurderingen af ​​tre bakterielle morfologiske typer (morpotyper) i vagina:

    A - Lactobacilli - store gram-positive stave (Lactobacillus acidophilus: store gram-positive stave)

    B - Vaginal gardnerella og bakterier - små gram-modtagelige og gram-negative kasser (Gardnerella vaginalis og Bacteroides arter: små gram-variable eller gram-negative stave)

    C - Mobilunkus - buede gramvariable sticks (Mobiluncus arter: buede gram-variable stænger).

    Et smear fra vagina er farvet af Gram og tæller separat antallet af identificerede morpotyper under nedsænkningsmikroskopesystemet i synsfeltet:


    MICROSCOPY AF MASKET FRA FUGEN OG KERVISK KANAL AF GRAM


    Mikroskopisk undersøgelse af podninger af cervikalkanalen og udflåd fra skeden er en nødvendig fremgangsmåde til screening og diagnosticering af smitsomme og inflammatoriske sygdomme i kvindelige kønsorganer (cervicitis, vaginitis), fordi det giver mulighed for at vurdere graden af ​​inflammation (leukocyt-reaktion) og tilstanden af ​​mikroflora og identificere elementer af svampe Candida, Trichomonas, intracellulære diplokokker.

    Derudover er i dag en bakterioskopi af et Gram-farvet vaginal smear det "guldstandard" til diagnosticering af bakteriel vaginose. Diagnose af bakteriel vaginose er baseret på tilstedeværelsen eller fraværet af følgende symptomer:

    • et fald i antallet eller forsvinden af ​​laktobaciller - grampositive stænger af forskellig længde og tykkelse
    • en stigning i antallet af gramvariable (blandet) cocco-bacilli mikroflora;
    • tilstedeværelsen af ​​nøgleceller, der er overfladiske celler i det vaginale epitel med bakterier klæber til dem, hvorved epithelceller har et kornet udseende, og disse celler synes fuzzy kanter.

    • A - Lactobacilli - store gram-positive baciller (Lactobacillus acidophilus);
    • B - vaginal Gardnerella og Bacteroides - lille gramvariabelnye og gramnegative cocci (Gardnerella vaginalis og Bacteroides arter);
    • C - Mobilunkus - buede gramvariable sticks (Mobiluncus arter).

    Vaginale udtværinger farvet af gram
    og betragter særskilt antallet af detekterede floraelementer:

    Ved gram udtværing

    Biologi og medicin

    Afhængig af strukturen af ​​cellevæggen er prokaryoter, der tilhører eubakterier, opdelt i to store grupper. Det blev fundet, at hvis faste eubakteria-celler blev behandlet først med krystalviolet og derefter iod, dannedes et farvet kompleks. Ved efterfølgende behandling med alkohol afhænger kompleksets skæbne forskelligt: ​​I de såkaldte gram-positive arter opretholdes dette kompleks af cellen, og sidstnævnte forbliver farvet i gram-negative arter, tværtimod vaskes komplekset ud af cellerne, og de bliver misfarvede. (Denne metode blev først foreslået i 1884 af den danske forsker H. Gram (Ch. Gram), der var involveret i farvning af væv. Senere blev det brugt til bakterier).

    I nogle eubakterier er en positiv reaktion, når den farves på den ovenfor beskrevne måde, kun karakteristisk for celler, som er i stadiet af aktiv vækst. Det blev fundet, at det malede kompleks er dannet på protoplastet, men dets tilbageholdelse af cellen eller udvaskning fra det under efterfølgende behandling med alkohol bestemmes af cellens strukturelle egenskaber.

    Farvning af stoffer øger følsomheden af ​​mikroskopi, da ufarvede bakterier er dårligt skelnelige selv med en stigning på 400-1000.

    Differentiel gramfarvning er den mest almindelige, selvom monokrom farvning også anvendes. Gramfarvning gør det muligt at skelne bakterier, hvis tykke cellevæg næsten udelukkende består af peptidoglycan (gram-positiv) fra bakterier, hvis cellevæg ud over et tyndt lag peptidoglycan har en ydre membran bestående af lipoproteiner og lipopolysaccharider (gram-negativ). Hovedfarvestoffet (fx krystalviolet) er fastgjort i væggen af ​​gram-positive bakterier, hvilket giver dem en blå-sort farve og vaskes let ud med alkohol (eller acetone) fra veggen af ​​gram-negative bakterier, hvorefter de farves med et kontrastfarve (f.eks. Safranin) i rødt.

    Gramfarvning er uundværlig i studiet af sputumudslæt. Hvis sputumet modtages korrekt, ses mindst 25 neutrofiler og mindre end 10 epitelceller i synsfeltet ved lav forstørrelse. Et større antal epithelceller og en række forskellige typer bakterier indikerer, at sputumet er forurenet med indholdet af oropharynx. Selv om det ofte er svært at skelne mellem normal mikroflora fra patogene bakterier, giver Grams smearflader værdifulde oplysninger, hvis den patogene bakterie har nogen indikation tilgængelig for det (biologisk signal). For eksempel er der i bakteriel vaginose synlige epithelceller med gram-positive bakterier synlige i et vaginal smear.

    Mikroskopi af afføring smed gramfarvet, anvendt som et screeningsundersøgelse. Når der konstateres neutrofiler, begynder de bakteriologisk forskning og bestemmelse af toksiner produceret af Clostridium difficile.

    Gramfarvning bruges også til at identificere bakterier og hvide blodlegemer i CSF-, synovial-, pleural- og peritoneale væsker. Den nedre grænse for følsomhed af metoden er 10.000 bakterier pr. 1 ml.

    For at øge følsomheden centrifugeres testvæsken, og der fremstilles et farvet smear smear. Denne procedure kaldes berigelsesmateriale. Det er enkelt og særligt værdifuldt for at detektere bakterier og hvide blodlegemer i CSF og syrefast bakterier i sputum.

    referencer:

    Metoder til generel bakteriologi

    Teknikken til at male udsmykninger. Til farvning udtrækker man malingsopløsninger eller blækpapir, som foreslået af A.I. Blå. Nem forberedelse, brugervenlighed samt evnen til at gemme blækpapir i ubegrænset tid var grundlaget for deres brede anvendelse i forskellige farvestoffer.

    Farvelægninger malerpapir. Et par dråber vand påføres på det tørrede og faste præparat, der er farvede papirer på 22 cm. Under hele farvningsperioden skal papiret forblive vådt og klæbe tæt på glasoverfladen. Ved tørring fugtes papiret desuden med vand. Varigheden af ​​smearfarvningen bestemmes ved farvningsmetoden. Ved farvningens afslutning fjernes papiret forsigtigt med pincet, og smøret vaskes med vand fra vand og tørres i luft eller filterpapir.

    Farvende smører med farvestofopløsninger. Farvestoffet påføres det tørrede og faste præparat med en pipette i en sådan mængde, at den dækker hele smøret. Når smørfarver farves med koncentrerede opløsninger af farvestoffer (Zielyas karbolic fuchsin, carbolic gentian eller crystal violet), farves de gennem filterpapir, der bevarer farvestofpartiklerne: en stribe filterpapir sættes på et fast smear, og farvestofopløsningen hældes på den.

    Til mikroskopisk undersøgelse udsættes præparater, tørrede og faste, farvning. Farvning er enkel og kompleks. Enkel farvning består i at anvende en enkelt maling på slagtilfælde i en vis periode. Ofte anvendes simpel vandmaling alkohol-vand (1:10) Pfeiffer fuchsin, Leffler methylenblåt og safranin. Eosin, som et surt farvestof, anvendes kun til at plette cytoplasmaet af celler og for at tynde baggrunden. Sure magenta er fuldstændig uegnet til farvning af bakterier.

    Med simpel farve forstår mikrobielle legemer farven på farvestoffet, der anvendes så intensivt som cellekernerne; Samtidig er cytoplasmaet og hele baggrunden af ​​smøret (hvis det ikke er et smear fra en ren kultur) malet i samme farve, men noget lysere. Fuchsin og gentian violet er mere intense malinger; methylenblå pletter meget lysere. Opfattelsen af ​​farve afhænger ikke kun af egenskaberne af maling, men også på egenskaberne af mikroberne, der skal farves. De fleste mikrober er let og hurtigt farvet med vand eller alkohol-vandige opløsninger af maling.

    For hårdt farvende mikrober (for eksempel tuberkulosens forårsagende middel) eller deres dele (sporer, flagella osv.) Skal der anvendes mere intensive (tvungen) farvningsmetoder.

    Det er muligt at tvinge farvningen: a) ved at forøge farvemængden af ​​de grundlæggende maling, b) ved at forlænge farveperioden og c) ved hjælp af pickles.

    For at øge farvestyrken udsættes maling for høj temperatur (opvarmning), indtil dampen fremstår (selv kogende). Ved at variere graden af ​​opvarmning kan du få forskellige grader af farvestyrke.

    Forlængelse af farveopløsningenes virkning på en genstand kan også i en vis udstrækning forøge farvningsgraden.

    Mordanter er stoffer, der letter penetrationen af ​​farvestof i celler: phenol, tannin, eddikesyre og krom syrer, alkalier mv. Mekanismens virkemåde er forskellig: i nogle tilfælde virker mordanter på farvestoffer i andre om cellers evne til at farve opfattelse. Mordanterne virker på smøret enten før malingens virkning (for eksempel når man farver flagellaen) eller sammen med maling (fenol i Tsili fuchsin) eller efter malingens virkning (Lyugolevsky-opløsningen i Gram-metoden).

    Ved maleriudtræk anvendes der foruden maling også såkaldte blegemidler eller farvestoffer. Sidstnævnte tjener til at fjerne overskydende maling fra hele den mikrobielle celle eller fra en del af den, når malingen er for kraftig ved adsorbering af materialet eller ved omsmaling af det ved hjælp af varme osv.

    Følgende anvendes som blegemidler: alkohol, 5% vandig opløsning af svovlsyre, 20-30% vandig opløsning af salpetersyre, 3% opløsning af saltsyre i absolut alkohol osv.

    For at male udsmykninger er det nødvendigt at have på skrivebordet et sæt farvestoffer i flasker (bedre end orange glas) med pipetter og gummikasser. Hætteglas bør mærkes med de relevante betegnelser; For at undgå hurtig forurening med malingmærker anbefales det at suge det med smeltet paraffin (ved anvendelse af en børste). Mætteglasene anbringes i en træstativblok (fig. 2).

    Fig. 2. Flasker til maling

    Til afvaskning af maling og skylning af smør er der brug for en flaske med et rør på et stativ til destilleret vand og en form (afløbsbog) med en standbro. Brostanden består af to glasrør eller stifter, der er forbundet i enderne med stykker af gummi rør. Standens bredde skal være mindre end glidens længde. Derudover kræves en alkohol (eller gas) brænder og kornet pincet til mikroskop slides til smøring. Når man maler med opvarmning, gribes glideskiven med pincet og holdes i en vis tid over flammen. Ved længerevarende farvning bruger de kuvetter eller små kopper, hvor de hælder maling og fordyber den i den. Når man samtidig maler flere udtværinger i kuvetten, for at forhindre brillerne i at stikke sammen, er de forbundet i to med den udsmide side ud og forstærket med gummiringe, der skæres fra rørene. Efter farvning vaskes vatpindene med vand og tørres grundigt med filterpapir.

    De seneste års arbejde har afsløret muligheden for at bevare mikrobernes levedygtighed, hovedsagelig sporbarhed, under farvning. Derfor er tilstrækkelig fastgørelse af stregerne nødvendig. Vask vand (hvis det er farvet) skal drænes i et specielt fartøj, efterfulgt af neutralisering, bør det brugte filterpapir (efter tørring af udstødningerne) ikke bortskaffes, men brændes, og de anvendte smørstoffer skal desinficeres.

    Enkle måder at male smøre på

    Med en simpel metode til maling hældes nogle få dråber af en vis alkohol-vand eller vandig malingopløsning på et fast smear i 1-2 minutter; Fuchsin (1:10) eller Leffler methylenblåt anvendes oftest til dette formål. Derefter vaskes malingen med destilleret vand, og smøret tørres mellem to strimler filterpapir. Normalt fuchsin (1:10) farve 10-30 sekunder og methylenblåt - 2-10 minutter. Fuchsin pletter smører mere intensivt, og når de er farvet med methylenblåt, opnås blide, mere elegante præparater. Smøret efter tørring med filterpapir skal være helt tørt, ellers hvis den resterende fugt kommer i kontakt med cedarolie, dannes en emulsion, og mikroskopi vil resultere i et uklart billede. Generelt afhænger varigheden af ​​farvning af farvningens type og kvalitet, graden af ​​modtagelighed af mikroben til farvning og tykkelsen af ​​smeden.

    Farve ved Muromtsev

    Forbered to løsninger:

    Carbolsyre (krystallinsk)

    Efter at malingen er opløst blandes begge opløsninger og filtreres gennem et papirfilter. Maling fortsætter i lang tid. Smears er malet gennem filterpapirstrimler i 15 til 30 sekunder.

    Fastgøring af smør, forfatteren anbefaler at producere en blanding af alkohol (80 dele) med formalin (20 dele) i 3-10 minutter.

    Med denne plet af udtværinger i mikrobielle celler påvises indeslutninger, bipolaritet, kapsler og sporer. Metoden er egnet til farvning af udstødninger fra organer, blod, kulturer på medier med native protein og på halvflydende agar.

    Baggrunden for lægemidlet fra disse substrater er rosa; vævsceller og mikrobielle legemer er malet i blå-blå farve.

    Svære (differentielle) smearfarvningsmetoder

    Komplicerede farvningsmetoder er baseret på egenskaberne ved den fysisk-kemiske struktur af den mikrobielle celle. Essensen af ​​disse metoder ligger i virkningen på smeden af ​​to farvestoffer, hvoraf den ene er den vigtigste (primære) maling, og den anden - den ekstra (kontrast). Efter udsættelse for den første maling er smeden misfarvet, og først efter den udsættes for yderligere farvning. En række kemiske reagenser (syrer, alkalier, alkohol, acetone osv.) Kan anvendes som blegemidler. Vask smeden med almindeligt vand er også en rent mekanisk blegning, men det kræver lang tid. Desuden er misfarvningen ufuldstændig. I forhold til blegemidler kan mikrober opdeles i grupper let og vanskeligt at bleges. Ikke alle typer mikrober er lige relevante for blegemidler; nogle er sure og alkoholbestandige, andre er kun syrefaste. Endelig modstår nogle, for eksempel sporer, kraftigt virkningerne af alle blegemidler og tilhører gruppen af ​​malingsbestandige.

    Komplekse farvemetoder har en vigtig differentieret diagnostisk værdi til karakterisering af mikroben under undersøgelse.

    Gram plet

    Ved behandling af udtværinger (sektioner) fra organer og væv, der indeholder mikroorganismer, gentianviolet og derefter jod, har præparatet, der er malet i sort, det formål at blegge under alkoholens virkning. Samtidig bliver nogle af de bakterier, der er indeholdt i smøret, misfarvede, mens andre bliver lilla. Med yderligere farvning (især med Pfeiffer's Fuchsin) er bakterier affarvet med alkohol farvede røde (gram-negative). Andre, der fastholder den violette farve (jod + gentian violet forbindelse), som ikke bleges med alkohol, tilhører gruppen af ​​gram-positive bakterier. Forskellen mellem gram-positive og gram-negative bakterier afhænger af forskellen i deres isoelektriske punkter, og evnen af ​​gram-positive bakterier til at fastholde farve er forbundet med tilstedeværelsen af ​​magnesiumsaltet af ribonukleinsyre, hvilke gram-negative bakterier ikke indeholder. Best af alt er Gram-pletten opnået efter smøringen er fastgjort ved en fysisk metode (opvarmning). Karakteristika ved holdningen af ​​bestemte typer bakterier til forskellige maling, især til farvning ved Gram-metoden, er karakteriseret ved mikrobess såkaldte tinctorielle egenskaber.

    Farvelægningsteknik. Et udtryk af filterpapir af en lidt kortere størrelse og et objektglas anbringes på et smeltefikseret med varme og en tilstrækkelig mængde krystalviolet, carbolisk eller anilin gentian violet opløsning eller en anden violet triphenylmethanmaling (for eksempel methylviolet) i 1-2 minutter hældes på den. Derefter drænes malingen, en stribe filterpapir fjernes, og Lugol-opløsningen hældes uden smøring med vand i 1-2 minutter. Opløsningen drænes og affarves lægemidlet i 96 ° C i 30-60 sekunder, vaskes med vand og farves med Pfeiffer's Fuchsin (eller fortyndes med safranin, neutralula eller vesuvin) i 2-3 minutter. Derefter vaskes malingen med vand, og smøret tørres med et rent filterpapir.

    Mikroskopisk billede: Hvis Gram smears er korrekt farvet, vil gram-positive mikrober blive farvet mørk lilla, og gram-negative farver vil blive farvet som yderligere maling (for eksempel Pfeiffer's pink farve af fuchsin fuchsin).

    Brug ikke forurenet filterpapir: mekanisk overførsel af mikrober fra ét smør til en anden er mulig, hvilket kan påvirke mikroskopiens resultater. Varigheden af ​​udsættelse for maling, Lugol opløsning (mordant) og alkohol afhænger af tykkelsen af ​​smeden. Især det afgørende punkt i gramfarvningen er misfarvningen af ​​smøret med alkohol. Ved kort eksponering for alkohol opnås gentagne præparater, og ved længerevarende eksponering vil alle mikrober (herunder p-positive) misfarve. På en tykk, tykk smear (for eksempel fra en agarkultur) bør tiden for udsættelse for alkohol være længere end et tyndt udtvær, især fra flydende kulturer. Når de blev udsat for alkohol på et ujævnt forberedt smør i dens tykme, forblev mikroberne ikke misfarvede, og i tynde ville de misfarve; du får et "motley" farvemønster, som kan føre til forkerte konklusioner.

    Nogle gange kan gram-negative bakterier observeres i kulturen af ​​gram-positive bakterier, hvilket er jo større, jo ældre er befolkningen. Dette er intet mere end bakterielle lig, der har gennemgået intracellulær autolyse, som følge heraf cellen har mistet magnesium ribonucleinater. På den anden side er i meget unge kulturer (flere timers vækst) af familien af ​​enterobakterier, gigantiske juvenile former af disse bakterier, der er 2-3 gange større end voksne (18 timer), meget basofile, fordi deres cytoplasma overbelastes med ribonucleater. Derfor, når de farves af Gram, er de farvet med magenta så intenst, at de i fattige lys kan tages som gram-positive vegetative former for sporreløse sticks.

    For nybegyndere såvel som i tvivlsomme tilfælde anbefales det at forberede kontrolpræparater på det samme glas, hvor prøvesmøret er placeret - en fra en mikroberkultur, naturligvis gram-positiv, og den anden fra gram-negative.

    Når misfarvning af lægemidlet i gramfarvet alkohol kan hældes direkte på smøret, skylles glasset konstant. Det er bedre at udføre misfarvning i kuvetter, hvor alkohol er hældt, og ved at tage Cornet's pincet, løftes lægemidlet og sænkes, idet man observerer farven på alkoholen, som strømmer ned fra glasset. Misfarvningen betragtes som fuldstændig, når alkoholdråberne flyder ned fra smøret, bliver ens i farve til alkoholen i kuvetten; Normalt tager det 10-30 sekunder, afhængigt af slagets tykkelse.

    Alkohol 96 ° i kuvetter bør udskiftes oftere (80 ° alkohol skiller sig ikke korrekt ud). Brugt alkohol bliver normalt hældt fra kuvetter til alkoholbrændere.

    For begyndere kan misfarvning af smør med iodiseret alkohol anbefales. Det er blevet fastslået, at hvis en lille jodtinktur sættes til affarvningsvæsken, misfarves der ikke mikrober, som er farvet gram-positivt, i en sådan væske selv i en time, og gram-negative er farvet i cirka 5 sekunder. Ifølge Savateev er det nok at tilføje 2-4 ml 10% iodtinktur pr. 100 ml 95 ° alkohol; løsningen kan vare i lang tid. Hvis acetone anvendes i stedet for alkohol, tilsættes jodtinktur før brug.

    To minutter er nok til misfarvning af smørefedt med iodiseret alkohol, efterfulgt af vask med vand og yderligere Pfeiffer-fuchsin farve.

    Ændring af Grams Farve Metode

    Som nævnt ovenfor er Gram-plet den vigtigste metode til identifikation af bakterier. Det er teoretisk muligt at opdele bakterier i to grupper: gram-positiv og gram-negativ; i virkeligheden er der tilfælde, hvor de samme bakterier er karakteriseret som "gramvalgbare". Da metoden først blev udviklet af Christian Gram i 1884, er der blevet offentliggjort talrige Gram farve modifikationer. En udtværing af bakterier til farvning på en glasskinne opnås ved en direkte metode fra en kultur på et flydende eller fast medium, men det er bedst at fremstille det fra en formalin-fast, vasket prøve. Et par ekstra minutter brugt til at suspendere bakterier i 5% (v / v) formalin, opsamle og vaske dem ved centrifugering, afregne, fordi cellens størrelse og form er godt bevaret, cellerne farves jævnt og tilfældigt spredte bundfald fra flydende kulturmedier er fraværende. Under alle omstændigheder anbefales det at tørre smøret i luften og reparere det ved opvarmning, som for en enkel farvning. Det er vigtigt at standardisere gramfarvningsmetoden. Lignende resultater giver to metoder til farvning - i modifikationen af ​​Hooker og i modifikationen af ​​Burke.

    Gramfarvning i en modifikation af Hooker.

    Opløsning A til fremstilling af farvestofreagenset:

    Krystalviolet (med 90% tørstofindhold)

    Ethanol 95% (vol / vol)

    Opløsning B til fremstilling af farvestofreagenset:

    Opløsninger A og B blandes for at opnå krystalviolet farvestofreagens. Lad i 24 timer og før brug filter gennem filterpapir.

    Jod og kaliumjodid knuses i en mørtel, og vand tilsættes langsomt med kontinuerlig slibning, indtil jod er opløst. Opbevares i en mørk kolbe.

    Opløsningsmiddel til blegning:

    Ethanol 95% (vol / vol)

    Safranin O [2,5% (vægt / volumen) 95% (vol / vol) ethanol]

    En lufttørret bakteriefremme smurt i varme nedsænkes i 1 minut i en krystalviolet farvningsopløsning.

    Smørret vaskes i en svag, vinklet sprøjtevand i 2 sekunder.

    Smøret anbringes i jodmordant i 1 minut.

    Den vaskes i en svag, kører ved en vinkel strøm af ledningsvand i 2 sekunder, hvorefter den tørres med blottpapir.

    Dyp smøret i 30 sekunder i 95% ethanol, ryst den sidstnævnte, hvorefter smøret tørres med blottpapir.

    Dyp smøret i 10 s i et ekstra farvestof.

    Smøret vaskes i en svag, vinklet vandhanevand, indtil farven forsvinder i afløbet, hvorefter den tørres med blottpapir.

    Gram pletter i Burke-modifikationen.

    Krystalviolet (med 90% tørstofindhold)

    Mordant forberedt på samme måde som for modifikation af Hooker.

    Opløsningsmiddel til misfarvning: (forsigtighed, brandfarlig!)

    Safranin O (med 85% tørstofindhold)

    Smøret, tørret i luft og fikseret ved opvarmning nedsænkes i opløsning A, 2-3 dråber af opløsning B tilsættes og inkuberes i 2 minutter.

    Vask smøret med jodmordant, og dækk det derefter i 2 minutter med en frisk mordant.

    Vattenspanden vaskes i en svag, vinklet vandstrøm fra hanen i 2 sekunder. Overfladen omkring smøret tørres med blottpapir, men selve smeden er beskyttet mod udtørring.

    Et affarvende opløsningsmiddel anbringes dråbevis til et smear med en vippeglasglas, indtil farven forsvinder fra opløsningsmidlet, som strømmer fra glasset. Derefter tørres smøret i luften.

    Grammetoden er dette. Hvad er Gram Metoden?

    Grammetoden er en metode til farvning af mikroorganismer til forskning, der muliggør differentiering af bakterier i overensstemmelse med deres biomasse biokemiske egenskaber. Den blev foreslået i 1884 af den danske læge G. K. Gram.

    Grambakterier farvet med anilinfarvestoffer - gentian eller methyl violet osv., Hvorefter farvestoffet er fikseret med en opløsning af iod. Under den efterfølgende vask af det farvede lægemiddel med alkohol, kaldes de typer af bakterier, der er stærkt farvede, gramgunstige bakterier (betegnet Gram (+)), i modsætning til gramnegative bakterier (Gram (-)), som misfarver, når de vaskes.

    Anvendes i diagnostik

    Gramfarvning er af stor betydning i systematikken af ​​bakterier såvel som til den mikrobiologiske diagnose af infektionssygdomme.

    Grampositive cocci (undtagen repræsentanter for slægten Neisseria) og sporiforme former for bakterier samt gær, er de malet i en blålig sort (mørkblå) farve.

    Mange nebulous bakterier er gram-negative, de bliver røde, cellekernerne bliver lyse rødt, og cytoplasma er lyserød eller crimson.

    Farvelægningsteknik

    Gramfarvning refererer til en kompleks farvningsmetode, når et smear påvirkes af to farvestoffer, hvoraf den ene er hoved og den anden er yderligere. Ud over farvestoffer anvendes blegemidler til komplekse farvningsmetoder: alkohol, syrer osv.

    Gramfarvninger bruger ofte anilinfarvestoffer af triphenylmetangruppen: gentian, methyl violet eller krystalviolet. Gram-positive Gram (+) mikroorganismer giver en stærk forbindelse med disse farvestoffer og jod. Samtidig misfarver de ikke, når de udsættes for alkohol, og som følge heraf ændrer mikroorganismerne ikke yderligere den oprindeligt vedtagne lilla farve med yderligere farvning med Fuchsin Gram (+).

    Gram-negative Gram (-) mikroorganismer danner en forbindelse med basiske farvestoffer og jod, der let ødelægges af alkoholens virkning. Som følge heraf bliver mikroberet misfarvet og farves derefter med magenta og får en rød farve.

    Materiale forberedelse til maling

    Testmaterialet spredes i et tyndt lag over overfladen af ​​et godt affedtet objektglas. Det forberedte smear tørres i luft og fastgøres efter fuldstændig tørring. Histologiske sektioner fremstilles ved en rutinemæssig teknik, fastsætter stykker af væv i formalin og hældes i paraffin.

    fiksering

    Ved fastgørelsen fastgøres smøret på glidens overflade, og de mikrobielle celler vaskes derfor ikke under den efterfølgende farvning af præparatet. Desuden pletter døde mikrobielle celler bedre end levende celler.

    Der findes en fysisk fixeringsmetode, som er baseret på effekten af ​​høj temperatur på den mikrobielle celle og kemiske metoder, der involverer anvendelse af kemikalier, der forårsager koagulation af cytoplasmatiske proteiner.

    Fysisk fixeringsmetode

    Et glasglas med et præparat tages med pincet eller I og II fingre i højre hånd ved kanterne med en børste opad og med en jævn bevægelse udføres de 2-3 gange over den øvre del af brænderflammen. Hele fixeringsprocessen bør ikke tage mere end 2 s.

    Fikseringens pålidelighed kontrolleres ved hjælp af følgende metode: glidefrit overflade på glideren anbringes på venstre side af bagsiden. Hvis smøret er ordentligt fast, skal glasset være varmt, men ikke forårsage en brændefornemmelse (70-80 ° C).

    Kemisk fixeringsmetode

    Til fastgørelse vatpinden anvendes methylalkohol, acetone, en blanding af Nikiforov (blanding af ethanol 96% og bedøvelsesmiddel ether i forholdet 1: 1), Carnoys fluid (ethylalkohol 96% - 60% chloroform, 30% iseddike 10%), alkohol -formel (40% formalin 5 ml, ethylalkohol 96-95 ml). En glasskinne med tørret udsmykning nedsænkes i en kolbe med et fikseringsmiddel i 10-15 minutter og tørres derefter i luft. Fastgørelse i par af 40% formalin i et par sekunder anvendes også.

    Smørefarvningsproces

    1. Hæld et af de basiske farvestoffer i 2-3 minutter på et fast smear. For at undgå udfældning bliver den farvet gennem filterpapir.
    2. Tøm malingen, fjern forsigtigt filterpapiret. Et smear hældes med en Lugol-opløsning eller en iodidopløsning ifølge Gram (en vandig opløsning af kaliumiodid og krystallinsk iod i et forhold på 2: 1) i 1-2 minutter, indtil præparatet er sortet.
    3. Opløsningen er drænet, en skylning skylles med 96 ° ethylalkohol eller acetone, hældes og drænes indtil smørefjerner og aftapningsvæsken er klar (ca. 20-40-60 sekunder).
    4. Vask forsigtigt glasset i rindende eller destilleret vand i 1-2 minutter.
    5. For at identificere den gram-negative gruppe bakterier farves præparaterne yderligere med fuchsin eller safranin (2-5 minutter).
    6. Vasket i rindende vand og tørret med filterpapir.

    Teknik farvning af bakterier i histologiske sektioner Gram-Weigert

    1. De afvoksede sektioner justeres til vand.
    2. Stain 20 minutter i 1% opløsning af pararosanilin eller basisk fuchsin i 1% eddikesyre (farvestofopløsningen opvarmes til kogning, afkøling og filtrering).
    3. Vasket i 3 skift af destilleret vand.
    4. Mal 5 min i 1% krystalviolet i destilleret vand.
    5. Skyl hurtigt i 1% natriumchloridopløsning.
    6. Forarbejdet i 30 sekunder i en blanding: 1 del jod + 2 dele kaliumiodid + 100 dele destilleret vand.
    7. Blot med filterpapir.
    8. Differentiate, anvende en blanding af lige mængder anilin og xylen (1-2 ml) til sektionen; opløsningerne drænes, indtil farvestrålende skyer holder op med at flytte væk fra skiven.
    9. Udført efter 3 ændringer af xylen.
    10. Indkapslet i balsam eller en hvilken som helst harpiks opløst i xylen.

    Resultat: Gram-positive bakterier er blå-sort, violet fibrin, kerner er røde.

    Se også

    • Farvelægningsmikroorganismer
    • Anilinfarvestoffer

    referencer

    På tysk

    • Gram, HC (1884). "Über die isolate Färbung der Schizomyceten i Schnitt- und Trockenpräparaten". Fortschritte der Medizin 2: 185-89.

    På engelsk

    Mikrobiologiske undersøgelsesmetoder

    Formålet med mikrobiologisk forskning er at fastslå visse mikroorganismers ætiologiske rolle i tilfælde af sygdom eller klinisk syndrom. Det skal erindres, at de agenser, betændelse i det reproduktive system kan være både UPM - repræsentanter for forbigående komponent af den normale mikroflora i skeden, og andre habitater såvel som absolutte patogener - patogener af seksuelt overførte infektioner. Et sådant sammenhæng mellem STI'er og opportunistiske infektioner (forårsaget af DMP) bestemmer behovet for en integreret tilgang til mikrobiologisk diagnose.

    INDIKATIONER

    Mikrobiologiske forskningsmetoder anvendes til at bekræfte eller udelukke sygdomme af infektiøs art.

    METODE

    REGLER FOR AT TAGE KLINISKE MATERIALER

    Udledning fra urinrøret tages med en plastisk engangs steril bakteriologisk løkke med et volumen på 1 μl eller en tynd dacron swab på en aluminiumtråd. Forudvendig åbning af urinrøret skal rengøres med en gasbind eller en bomuldspindel. I mangel af synlige sekretioner kan lægen udføre en let massage i urinrøret. Tamponen / sløjfen indsættes i urinrøret med 1-2 cm og fjernes ved let at trykke på side og bagvægge. Til mikroskopiske og immunofluorescensundersøgelser overføres materialet til et glasskinne ved at rulle en tampon eller flytte en sløjfe med et let trykmateriale over det. Til kultur og PCR placeres materialet i rør med passende transportmedier.

    Eksterne kønsorganer, vagina til sløret: udtværinger taget med sterile bomulds (Dacron) tamponer fra patologisk ændrede områder; For betændelse i vestibulens store kirtel udføres punktering, når abscessen åbnes, tager kirtlerne med en steril vatpind.

    Vagina: Efter indføring af spejlet og elevatoren tages udledningen med en steril vatpind fra den bageste fornix eller fra patologisk ændrede dele af slimhinden. Med henblik på kultur placeres vatpinden i et sterilt rør og sendes straks til laboratoriet. Hvis dette krav ikke kan opfyldes, placeres den udtagne prøve i et reagensglas med et transportmedium.

    Med henblik på mikroskopi overføres den udtagne prøve på et glasskinne, der ruller tamponen på alle sider af glasset, forsøger at distribuere materialet jævnt og holder den naturlige indbyrdes placering af alle bestanddele af biocenosen; smøret tørres i luft, fastgøres med 96% ethanolopløsning (2-3 dråber pr. smør indtil fuldstændig fordampning), mærket glas og i en lukket beholder sendt til laboratoriet. Under dyrkningsdiagnosen af ​​trichomoniasis placeres den udtagne udledning straks i et næringsmedium og transporteres til laboratoriet.

    Livmoderhals: efter eksponering cervikal vaginal spekulum del heraf blev behandlet forsigtigt med en vatpind fugtet med steril 0,9% natriumchlorid eller natrium- vand, derefter en standard vatpind forsigtigt injiceret i cervikalkanalen under udledning, er vatpinden udtages uden at røre væggene i skeden, og anbring det i et reagensglas med et transportmedium til dyrkning. For at udføre mikroskopi ved immunofluorescensmetode i forskellige modifikationer, virologisk forskning eller PCR, tages materialet med en speciel børste, som indsættes i kanalen efter at have fjernet slimpluggen eller tager en prøve til dyrkning. Efter at tamponbørsten er indsat i livmoderhalskanalen, roteres den flere gange med 1-2 cm for at opnå cellulær skrabning, men undgå scarification og blodelementer på tamponen. Det taget materiale placeres i reagensglas med et passende transportmedium. For mikroskopiske og immunofluorescensundersøgelser overføres den udtagne prøve straks fra vatpinden til en glasskinne.

    Uterus: Material fra livmoderen til forskning kan kun opnås ved at anvende en speciel anordning med en ydre belægning på sprøjteasugeren. Iagttagelse af asepsis regler, passerer livmoderhalskanalen og i livmoderen åbner sprøjtens ydre membran og derefter aspirerer indholdet. Luk derefter den ydre kappe og fjern sonden fra livmoderen.

    vedhæng i livmoderen: materialet fra kilden til infektion kan kun opnås ved et kirurgisk indgreb (pus, ekssudater, biopsier) eller under diagnostisk punktur af tumor formationer i bækkenet, udført gennem den vaginale hvælving (bør overveje muligheden for forurening af prøven af ​​vaginal mikroflora). I nogle tilfælde, hvis infektionsstedet i livmoderbøjlerne kommunikerer med livmoderen, kan gentagne studier af livmoderhalskanalen være nyttige, når resultaterne af undersøgelsen er af samme type. Urin: Efter en grundig skylning af de ydre kønsorganer opsamles en medium del af morgenfri frigivet urin i en mængde på 5-10 ml i en steril beholder. I betragtning af at mikroorganismer indeholdt i urinen begynder at formere sig ved stuetemperatur, skal prøven leveres til laboratoriet inden for 1-2 timer for at undgå falske resultater ved kvantificering af graden af ​​bakteriuri. Hvis det er umuligt at opfylde dette krav, er det muligt at opbevare urinprøven ved en temperatur på 4 ° C i køleskab i højst 12 timer.

    Blod: Blodkultur (påvisning af bakterieæmi) er nødvendig, hvis du har mistanke om udviklingen af ​​systemisk inflammationssyndrom. Vedvarende hypertermi, kulderystelser, hypotermi, leukocytose, tegn på multiorgan dysfunktion tjener som kategoriske indikationer for mikrobiologisk undersøgelse af blod. Blodprøver blev taget så tidligt som muligt fra starten af ​​feber 2- 3 gange med et interval på 30-60 minutter fra de perifere vener i arme (blodprøvetagning i en højde af feber ikke øge følsomheden metode, jo vigtigere bliver den optimale mængde af donorblod for at detektere sygdommens ætiologi). Optimal brug af standard kommercielle flasker med tilberedte næringsmedier til dyrkning af aerobic mikroorganismer og strenge anaerober. Særlig opmærksomhed på overholdelse af reglerne for asepsis: huden på venepunktionsstedet behandles med en 1-2% opløsning af jod eller povidoniodin med bevægelser fra center til periferi i mindst 1 minut. Efter desinfektion er palpation af venepunkturstedet uacceptabelt. Umiddelbart før punktering af venen behandles huden med en 70% ethanolopløsning. Manipulationen udføres i sterile handsker. Plasthætter fjernes fra flaskerne, gummipropper tørres med 70% ethanolopløsning. Efter at have taget blod fra en vene ændrer de nålen, og ved at stikke en gummiprop, bringes blod ind i hætteglasset (ca. 10 ml blod er i hvert af de to hætteglas). Hos børn under 1 år tager 0,5-1,0 ml blod i en flaske. Hos børn fra 1 år til 6 år er den samlede mængde blod taget 1 ml for hvert levetid, og dette volumen fordeles mellem to flasker. Hos børn og voksne, der vejer fra 30 til 80 kg, fordeles 10-20 ml blod mellem to hætteglas.

    At tage en prøve fra perifer venen og den anden fra kateteret er kun tilladt i undtagelsestilfælde: Identificer om nødvendigt den kateterassocierede bakteriæmi eller i tilfælde af objektive vanskeligheder forbundet med venipunktur.

    Mikroskopisk undersøgelse af kliniske prøver

    Et vigtigt stadium i mikrobiologisk forskning i diagnosticering af STI'er og opportunistiske infektioner. Gør det muligt at give en foreløbig vurdering af den kvalitative og kvantitative sammensætning af mikroflora i den patologiske fokus, vurdere kvaliteten af ​​den capture materiale (svarende til sit site af inflammation, såsom tilstedeværelsen af ​​det vaginale epitel i svaberprøver fra livmoderhalskanalen, udgør en overtrædelse af reglerne for udvælgelse bioassays), samt at identificere de mikroorganismer vokser ikke på almindelige næringsmedier (gonokokker, trichomonader, strengt anaerobe bakterier).

    Følsomheden af ​​metoden til lysmikroskopi er ved detektion af mikroorganismer i en mængde på 4-5 lg CFU / ml og mere. Derfor kan i nogle tilfælde detekteres etiologisk signifikante mikroorganismer ved mikroskopi. Dette refererer primært til strengt anaerobe bakterier, normalt med lave patogene evner, deres ætiologiske rolle manifesteres på et højt kvantitativt niveau efter akkumulering i infektionskilden. Overvejer ejendommelighed af mange slags morfologi strenge anaerober (bakteroidyprevotelly, fuzobakterii, Mobiluncus, veylonelly, leptotrihii) og mikroaerofila gardnerelly, deres detektion i Gram-farvede smears udledning viser deres ætiologisk rolle. Fundamentalt vigtigt er mikroskopi af vaginale udslæt ved diagnosticering af bakteriel vaginose og andre vaginale infektioner.

    Flertallet af valgfrie anaerobe DIM'er har imidlertid ikke morfologisk originalitet, og deres grad af patogenicitet og følsomhed over for antibiotika er tværtimod meget forskelligt. Derfor er UPM kulturel forskning for denne gruppe nødvendig. Også diagnose af bakteriel vaginose, mikroskopisk metode har den fordel i forhold til kultur undersøgelse til diagnose af relativt sjældne i de reproduktive alder stater vaginal microecology: Cytolytisk vaginose, mellemform microcenosis, vaginale epitel atrofi (sidste karakteristisk for menopause alder).

    Diagnose af vulvovaginal candidiasis kan oftest udføres ved smørmikroskopi af en aftagelig vagina for at detektere i farvede eller native udstødninger af svampens elementer: spirende gærceller, fragmenter af pseudomycelium med blastosporer. Påvisning af svampeelementer i udstødninger indikerer et stort antal af dem (mere end 4-5 lg CFU / ml) og ledsages oftest af en udtalt leukocytreaktion i et vaginalt smear og kliniske manifestationer af den inflammatoriske proces i vagina, hvilket er tilstrækkeligt til at bekræfte den kliniske diagnose af vaginal candidiasis.

    I laboratoriediagnosen af ​​gonoré foretages først og fremmest mikroskopi af udstødninger fra urinrøret og livmoderhalsen (hvis der ikke er tegn på undersøgelse af andre steder: svælg, conjunctiva, endetarm). Du bør forsøge at gøre parallelt for 2 streger fra hvert sted til farvning af blå og Gram. For akut gonorré karakteriseret ved fravær eller ringe antal repræsentanter for normale mikroflora (lactobaciller), et stort antal af neutrofile leukocytter og tilstedeværelsen af ​​gramnegative diplokokker anbragt inden leukocytter (fænomenet ufærdige fagocytose) og uden leukocytter. Kronisk gonoré er præget af tilstedeværelsen af ​​forskellig mikroflora sammen med gram-negative diplokokker indenfor og uden for leukocytter og et stort antal neutrofiler. Oftest kan diagnosen gonoré laves på basis af mikroskopi af Gram smears. Men for at gravide kvinder, unge og børn helt kulturstudier med identifikation af Neisseria gonorrhoeae arter skelne fra ikke-patogene Neisseria, som genkender komponenter af normal vaginal mikroflora hos piger, og i tilfælde af at tage materiale fra oropharynx bør være opmærksomme på det store antal arter af ikke-patogene Neisseria i disse udstrygninger på nogen alder.

    Den mikroskopiske metode forbliver i øjeblikket den vigtigste i diagnosen urogenitalt trichomoniasis. Gennemfør en undersøgelse af det native lægemiddel og / eller farvet smear. Mikroskopi af det native stof, er det vigtigt at huske, at frisk materiale (aftagelig urinrør, vagina) skal undersøges - i forberedelsen afslører de levende, mobile Trichomonas. For at gøre dette skal du forberede lægemidlet i overensstemmelse med metoden med "knust" dråbe (taget som afladning med tilsætning af varm 0,9% natriumchloridopløsning tæt på kropstemperaturen dækket med et dækglas) eller "hængende" dråbe (suspensionen fra de udskårne udskillelser placeres i glasdysens brønd) og mikroskopisk ved en forstørrelse på 400 gange, når kondensatoren sænkes. Forberedelser til farvning med methylenblåt, Gram eller Romanovsky - Giemsa fremstilles ud fra dette materiale. Diagnosen er etableret på grundlag af identifikationen af ​​typiske former for Trichomonas vaginalis i udstødninger.

    Ved evaluering af resultaterne af vaginal smearmikroskopi skal man være opmærksom på følgende punkter:

    • tilstand af det vaginale epitel: domineret af cellerne i overfladen, mellemliggende eller parabasale lag; Tilstedeværelsen af ​​såkaldte "nøgle" -celler - overfladepitelceller tæt tæmmet med små gramvariable stænger, der klæber til dem, gemmer cellegrænserne (figur 6-1) eller "false-key" -celler - øget vedhæftning på epithelcellerne af gram-positive stænger, oftest lactobaciller ( Figur 6-2);
    • leukocytreaktion: dets tilstedeværelse, sværhedsgrad, manifestationer af fagocytose, dens afslutning
    • sammensætning af mikroflora: kvantitativ og kvalitativ vurdering ved morpotyper og tinctorielle egenskaber.

    Fig. 6-1. False Key Cells (Gram smear microscopy).

    Fig. 6-2. Normotsenose (mikroskopi af Gram smear). Evaluering af total mikrobiologisk kontaminering udføres på et 4-punkts system (Nugent-kriterier, noget modificeret af os) - ved antallet af mikrobielle celler, der er detekteret i samme synsfelt under mikroskopi med nedsænkning:

    + - op til 10 mikrobielle celler i synsfeltet - minimumsnummeret ++ - fra 11 til 100 mikrobielle celler i synsfeltet - et moderat tal; +++ - fra 100 til 1000 mikrobielle celler i synsfeltet - et stort antal;

    ++++ - mere end 1000 mikrobielle celler i synsfeltet - en massiv mængde

    Den kvalitative vurdering af den vaginale mikroflora indbefatter differentieringen af ​​alle morfotyper i henhold til deres tinctoriale egenskaber og morfologiske egenskaber. Der er morpotyper af lactobacilli, fusobakterier, bakteroider, mobilunkusov, leptotrichia, weillonellus, gardnerellaer, samt gram-positive kokoser, coliformsticks, gærsvampe. Trichomonas og andre parasitter kan findes i smøret.

    Når man mistænker syfilis, har mørk feltmikroskopi af aftagelige erosioner og sår og metoden til direkte immunofluorescens ved anvendelse af AT diagnostisk diagnostik til T. pallidum ikke mistet deres diagnostiske værdi. Disse metoder anvendes i tilfælde med kliniske manifestationer på huden og slimhinderne, der mistænkes for syfilis. Derudover kan præparater til mikroskopi fremstilles fra punkterede regionale lymfeknuder, cerebrospinalvæske, fostervand. Erozivnoyazvennuyu overfladen forsigtigt (for ikke at modtage blødning) blev oprenset under anvendelse af en gaze fugtet 0,9% natriumchloridopløsning, derefter forsigtigt at åbne og lukke to fingre uædle sår / erosioner, stimulere sekretionen af ​​serøs væske, som tager bakteriologisk løkke eller forsigtigt gælder for erosiv overfladeglas glide. Den resulterende serøse udledning blandes med en lige stor mængde 0,9% natriumchloridopløsning, dækket af et dækglas, og det native præparat er mikroskoperet for at detektere patogenet for en række karakteristiske morfologiske tegn og bevægelsestype. Visse erfaringer er nødvendige for at differentiere, i mikroskopi, bleg treponema fra treponemcommensaler i urogenitalt område.

    Mere objektiv kan være diagnosen af ​​mikroskopi præparater ved hjælp af direkte immunofluorescens. I disse tilfælde tørres udladningen taget fra en glidesklie fra vævsvæsker, overfladerne af patologiske områder (herunder obduktionsmateriale) i luft, fastgøres med ethanol eller methanol. Derefter påføres et anti-treponemal-globulin, der er specifikt for T. pallidum, på præparatet. Mikroskopisk undersøgelse af midlet detekteres ved en lysegrøn specifik fluorescens.

    Immunoluminescerende metode - HG's hoved- og laboratoriediagnostik, mens der i forbindelse med forberedelsen af ​​det patologiske materiale registreres Ag-virus. Normalt anvendes metoden til direkte immunofluorescens, hvilket gør det muligt at bestemme begge typer HSV og HSV1 og HSV2 serotyper separat. Metodens følsomhed og specificitet afhænger af kvaliteten af ​​de anvendte diagnostiske kits. Materialet til undersøgelsen er sædvanligvis væsken fra de åbne vesikler, udslip af hudens erosive overflader og slimhinder eller skrabning fra væggene i livmoderhalskanalen (med latent infektion). Materialet er taget med en bakteriologisk løkke eller en speciel vatpind og overføres til en glasskinne.

    I urogenitalt chlamydia er detektion af Ar chlamydia ved anvendelse af immunofluorescensmikroskopi et af de førende laboratoriediagnostiske metoder. Normalt anvendes direkte immunofluorescens, under hvilke monoklonale antistoffer påføres forskellige Chlamydia Ag-lipopolysaccharider (gruppe), hovedproteinarten af ​​Chlamydia ydre membran og antistoffer mod det rekombinante Ag chlamydia. Kvaliteten af ​​diagnostik bestemmer graden af ​​følsomhed af metoden. Kvaliteten af ​​at tage materialet er af stor betydning ved evaluering af resultaterne af direkte immunofluorescens: Ved udtværing på glasset af en prøve taget fra livmoderhalskanalen bør cylindriske epitelceller være til stede, og der bør ikke være pladehæmmende epitelceller, røde blodlegemer og hvide blodlegemer. Resultatet betragtes som positivt, hvis man i smøret af et aftageligt mikroskop med et fluorescerende mikroskop på en orangebrun baggrund af epithelceller finder en mindst 5 grundlegemer med en stigning på 100 gange. På grund af mulige falske positive resultater anbefales denne metode ikke til undersøgelse af materialer afledt af nasopharynx og endetarm.

    KULTURLIG FORSKNING

    Metoden til plantning og isolering af rene kulturer af patogener af sygdommen tjener som "guldstandarden" af mikrobiologisk diagnostik. Sammen med mikroskopi er kulturforskning den vigtigste metode til diagnosticering af gonoré, trichomoniasis, klamydia. Molekylære og biologiske forskningsmetoder er endnu ikke specifikke nok til at opdage disse STI-patogener for at erstatte klassiske metoder, men uden tvivl tilhører fremtiden dem. Der er opstået en anden situation med opportunistiske infektioner i kønsorganerne, hvoraf antallet af antibiotika og urbaniseringen af ​​samfundets liv stiger stadigt, deres ætiologiske struktur og følsomhed overfor antibiotika ændrer sig dynamisk. En hyppig antibiotikaresistens af disse mikroorganismer forårsager, at behandlingen svigter, derfor er et passende valg af rationel etiotropisk behandling under moderne forhold anerkendt som et konstant klinisk problem.

    Det er kendt, at de forårsagende midler til inflammatoriske processer i kønsorganer kan være en række UPM, som normalt er en del af den transiente komponent af den oprindelige (normale) mikroflora af vagina og tilstødende biotoper. Deres patogene egenskaber manifesteres kun under visse betingelser, lidelser i immune homeostasen af ​​makroorganismen og lokal koloniseringsresistens. Under disse forhold bør mikrobiologisk diagnostik tage højde for den mulige etiologiske rolle af en bred vifte af patogener, og ikke kun noget specifikt patogen, som ved diagnosticering af klassiske infektionssygdomme forårsaget af absolutte patogener. Undersøgelsens opgave er ikke kun identifikationen af ​​mikroorganismer, der findes i det patologiske materiale, men også begrundelsen for deres etiologiske rolle i den inflammatoriske proces i denne patient. Derfor er det meget vigtigt at bruge de mest alsidige næringsmedier, der er egnede til dyrkning af en bred vifte af mikroorganismer, når man syder klinisk materiale, især fra loci, og som normalt har mikroflora. I dette tilfælde er det nødvendigt at tage hensyn til de kvantitative forhold mellem væksten af ​​forskellige typer mikroorganismer i primærsåning, da den sande årsagsmodtager ofte spiller den dominerende rolle blandt associerede virksomheder. Der er dog arter, der viser patogene egenskaber i en lille mængde (streptokokker i gruppe A og B, proteus, Klebsiella, Staphylococcus aureus, Listeria osv.).

    Mikrobiologisk diagnose af vaginens opportunistiske infektioner er baseret på en integreret vurdering af resultaterne af mikroskopiske og kulturelle studier. Samtidig vurderes den strenge anaerobe mikroflora komponent ved hjælp af mikroskopi af gram - et stort antal anaerobe morpotyper opdaget ved lysmikroskopi (deres antal i den aftagelige vagina overstiger 6 lg CFU / ml) indikerer deres etiologiske rolle. Samtidig er bestemmelsen af ​​anaerobeers følsomhed over for antibiotika ikke klinisk hensigtsmæssig, da langt de fleste af dem er meget følsomme for antibiotika med anti-anaerob aktivitet (clindamycin, metronidazol).

    Tværtimod er den diagnostiske værdi af mikroskopisk undersøgelse af vaginal udledning betydeligt reduceret med hensyn til fakultative aerobe og aerobe mikroorganismer. Dette skyldes for det første, at de patogene kapaciteter af disse bakterier kan manifestere sig ved en relativt lille (3-5 lg CFU / ml) mængde, som ikke påvises ved mikroskopi. For det andet, selvom morpotyperne af fakultative anaerobe bakterier findes i gram, er de morfologisk de samme i mange arter og bakterierækker (disse er coliforme sticks eller gram-positive kokoser). Samtidig kan deres patogene egenskaber og følsomhed overfor antibiotika være meget forskellige. For at karakterisere den fakultative anaerobe del af mikrocenose såvel som mikroaerofiler (primært lactobaciller), som ved morfologi kan ligner mange typer obligatoriske anaerobe bakterier (clostridier, eubakterier, propionibakterier osv.), Er der behov for en kulturundersøgelse - såning af vaginal udledning. Til disse formål anvendes 5% blodagar (det mest universelle medium for de fleste UPM), Saburo-agar (til isolering af svampe), MPC-medium (til dyrkning af lactobaciller).

    Resultaterne af kulturundersøgelsen giver mulighed for at vurdere artssammensætningen og det kvantitative forhold mellem forskellige arter i forbindelse med mikroorganismer, herunder svampe og også lactobaciller, og derved bekræfte, at de laktomorfotyper, der blev påvist ved grammatisk mikroskopi, tilhører lactobacilli-slægten. Udvælgelse af patologisk materiale og identifikation af forskellige arter af Enterobacteriaceae-familien, stafylokokker, streptokokker, ikke-fermenterende bakterier, Neisseria, Corynebacteria, svampe og andre mikroorganismer, efter kvantificering af deres vækst, bestemmer graden af ​​deres etiologiske betydning ved udviklingen af ​​vaginitis hos en bestemt patient.

    I tilfælde, hvor diagnosen bakteriel vaginose er lavet ved mikroskopi af et gram-negativt smear, kan resultaterne af såning afsløre forhøjede UPM-titere (svampe, enterokokker, coliforme og andre bakterier), som kan forårsage komplikationer efter etiotropisk terapi med lægemidler med antianærobisk aktivitet. Især bør der tages hensyn til mikroorganismer, som selv i lave koncentrationer er en faktor med øget risiko for fosteret (Listeria, Streptococcus Groups A og B).

    Metoder til identifikation af nukleinsyrer

    Metoder til påvisning af DNA- og RNA-patogener anvendes i øjeblikket hovedsagelig til diagnosticering af virusinfektioner. Metoder til gendiagnostik er baseret på identifikationen af ​​nukleotidsekvenser direkte i det patologiske materiale ved hjælp af molekylære prober - kunstigt afledte nukleinsyrer, der er komplementære til virale nukleinsyrer og mærket med biotin eller en radioaktiv mærkning.

    Et træk ved PCR-metoden er multipel kopiering (amplifikation, replikation) under anvendelse af DNA-polymeraseenzymet af et specifikt DNA-fragment bestående af flere tiere eller hundredvis af nukleotidpar, hvilket er unikt, det vil sige specifikt for denne type viruspatogen. Replikeringsmekanismen er sådan, at færdiggørelsen af ​​fragmentet kun kan begynde i visse startblokke, for dannelsen af ​​hvilke i givne regioner af DNA'et, primere - specielt syntetiserede oligonukleotider - anvendes. Primerne er komplementære til sekvenser inden for grænserne af et specifikt fragment, og DNA-syntese går kun i disse grænser.

    PCR-processen består i et stort antal syntesecykler (amplifikation) af et specifikt DNA-fragment, akkumuleringen af ​​et stort antal kopier, som derefter kan detekteres ved hjælp af konventionelle metoder til påvisning (immunofluorescensanalyse, elektroforese).

    ● Enkel implementering ● Mulighed for fuldstændig automatisering ● Hurtighed for opnåelse af resultat ● Lav mængde af patologisk materiale, der er nødvendigt for forskning ● Mulighed for at diagnosticere akutte, kroniske, latente infektioner;

    ● identifikation af uudslettelige, vedholdende patogener

    PCR følsomheden er den mest perfekte som en diagnostisk metode (flere størrelsesordener højere end andre tests). Metodens specificitet er også høj, men de fleste testsystemer er hidtil ikke pålidelige nok til at tvinge ud klassiske metoder til diagnosticering af selv absolutte patogener.

    Hvad angår opportunistiske infektioner, kan betydningen af ​​molekylærgenetiske diagnostiske metoder endnu ikke genkendes som meningsfuld, da den afgørende faktor i udviklingen af ​​sådanne inflammatoriske processer er den kvantitative faktor og ikke tilstedeværelsen af ​​mikroorganismen selv i det pågældende sted.

    I øjeblikket anvendes PCR-metoder i vid udstrækning til diagnosticering af virale, parasitiske og bakterielle STI'er, ofte som primær screening samt kontrol af helbredelse i kombination med andre metoder til laboratoriediagnose. Ved hjælp af den nyeste teknologi, såsom real-time PCR og NASBA, er det muligt at bestemme den nøjagtige mængde virus hos HIV-patienter.

    SEROLOGISKE DIAGNOSTISKE METODER

    Metoder der identificerer specifikke AT- og Ar-patogener. Deres rolle er vigtig, især i tilfælde hvor isoleringen af ​​patogenet giver betydelige vanskeligheder. Når specifik AT er påvist, er det nødvendigt at fastslå en stigning i deres titre, i forbindelse med hvilken parret sera studeres med et interval på 2-3 uger. Definitionen af ​​klasser af immunglobuliner beskriver klart stadierne af den infektiøse proces og kan i nogle tilfælde tjene som et prognostisk tegn på kurset.

    Af stor betydning er metoder til at detektere Ag patogener. De kan detekteres allerede i de tidligste stadier af den infektiøse proces, hvilket muliggør en hurtig diagnose, og kvantitativ bestemmelse af Ar i sygdommens dynamik tjener som et kriterium for effektiviteten af ​​behandlingen.

    Serologiske metoder er blevet afgørende for diagnosen syfilis og hiv-infektion. Ved diagnosen HIV-infektion anvendes sædvanligvis enzymbundet immunosorbentanalyse, hvilket gør det muligt at opnå positive resultater af undersøgelsen så tidligt som 1-1,5 måneder efter infektion. Positive screeningsresultater ved anvendelse af enzymimmunoassay kræver bekræftelse ved hjælp af immunoblot-metoden, hvilket muliggør verifikation af antistoffer mod forskellige virale proteiner.

    Ved diagnosen syfilis anvendes der i dag forskellige serologiske metoder, som muliggør detektion af antistoffer mod forskellige AH ​​T. pallidum-determinanter i kroppen. Afhængigt af den anvendte Ag er serologiske reaktioner opdelt i to grupper: treponemal og ikke-treponemal. Den første bruges til screening. De er teknisk enkle, kræver ikke meget tid, en kvantitativ version af reaktionen med bestemmelse af AT-titer er mulig, hvilket gør det muligt for dem at blive anvendt til at vurdere effektiviteten af ​​behandlingen. Disse tests opdager imidlertid ikke AT i de første 2-4 uger med primær syfilis, og falske positive og falske negative reaktioner er mulige.

    Treponemal test har høj specificitet og tillader at bekræfte resultaterne af ikke-treponemal test. Men treponemalprøver var upålidelige i studiet af cerebrospinalvæske (undtagen for reaktionen ved direkte hæmagglutination), de anvendes heller ikke som kontrol for effektiviteten af ​​behandlingen, og muligheden for falske positive reaktioner er ikke udelukket.

    Med opportunistiske bakterieinfektioner, hvis forårsagende midler har mange fælles argens med værtsens argulære Ag, og som tjener som svage stimulatorer til produktion af specifikke antistoffer, anvendes serologiske diagnostiske metoder praktisk taget ikke.

    FORTOLKNING AF RESULTATERNE AF MIKROBIOLOGISK FORSKNING

    EVALUERING AF RESULTATERNE AF MIKROBIOLOGISKE FORSKNINGER AF DE FACILITEREDE FEMALE GENITALE ORGANER

    Til vurdering af resultaterne af mikrobiologiske undersøgelser af separeret kvinders kønsorganer skal betragtes et sæt attributter i hvert tilfælde: data mikroskopi primær smear test materiale, resultaterne af direkte såning på faste medier næringsstof (kvantitativt skøn af væksten af ​​forskellige typer), såvel som de kliniske symptomer på sygdommen og historie for den patient. Således i undersøgelsen af ​​materiale af lukkede hulrum (punktformig tumor formationer i bækkenet, fostervand) samt organer, normalt sterilt (uterus indhold skrabning endometriske stykker af organer og væv fjernet under kirurgi), væksten af ​​mikroorganismer, især i monokultur beviser for deres etiologiske rolle. I undersøgelsen af ​​materiale fra loci og normalt med en række mikroflora er stor betydning knyttet til vurderingen af ​​artssammensætning, kvantificering af væksten af ​​forskellige arter dyrket under primærsåning, ensartethed af resultater med gentagne undersøgelser såvel som kliniske data. Baseret på den integrerede vurdering af resultaterne af mikroskopi og kultur for udslip af vagina, kan følgende mikrobiologiske kriterier for vurdering af tilstanden af ​​vaginal mikrocenose til individuelle nosologiske former hos kvinder i reproduktiv alder foreslås.

    NORMOTSENOZ
    • Mikroskopisk smear Gram farves (Figur 6-3.): ♦ vaginale epitel indeholder cellerne af overfladelagene, det mellemliggende lag er mindre almindelige celler (forhold kan variere efter faserne i menstruationscyklus, i graviditeten, mange mellemliggende celler), "nøgle" celler, der mangler ♦ leukocytreaktionen er fraværende eller svagt udtrykt - isolerede leukocytter i synsfeltet ♦ det totale antal mikroorganismer er moderat eller stort ♦ den dominerende morpotype er lactobacilli, andre Rototyper er enten fraværende eller deres nummer beregnes

    enkelt mikrobielle celler i sjældne synsfelter.

  • Kulturel forskning: ♦ total mikrobiell kontaminering - 6-8 lg CFU / ml; ♦ absolut overvejelse af lactobaciller;

    ♦ UPM i lav titer (mindre end 3 lg CFU / ml) eller fraværende.

    Fig. 6-3. "Nøgle" celler (Gram smear mikroskopi).

    BACTERIAL VAGINOSIS
    • Mikroskopisk smøre farves Gram (. Fig 6-4): ♦ vaginale epitel indeholder cellerne af overfladelagene er sjældne intermediære celler ofte - "nøgle" celler; ♦ leukocyt reaktionen er sædvanligvis fraværende; ♦ samlede antal af mikroorganismer massive, mindre - stor;

    ♦ Morphotyper af strenge anaerober og gardnerella hersker, laktomorfotyper er fraværende eller er ikke bestemt som single i alle synsfelter.

  • Kulturmetode: ♦ Total mikrobiologisk kontaminering overstiger 9 lg CFU / ml; polymikrobielle mikroflora med absolut forekomst af obligatoriske anaerobe arter og gardnerella; ♦ ved anvendelse af kun aerob dyrkning betingelser er væksten af ​​mikroorganismer fraværende eller UPM vækst observeres, ofte i en lille titer;

    ♦ der er ingen vækst af lactobaciller eller deres titer er reduceret kraftigt (mindre end 5 lg CFU / ml).

    Fig. 6-4. Bakteriel vaginose (Gram smear mikroskopi).

    VAGINAL CANDIDOSIS

    Afhængig af koncentrationen af ​​svampe i udslip af vagina og den ledsagende mikroflora kan der skelnes mellem tre former for candidal vaginal infektion.

    • Mikroskopi udstrygninger farvet med Gram-farvning (Figur 6-5.): ♦ vaginale epitel overvejende overfladiske lag, men kan være selv mange mellemliggende og parabasale celler (proportionale med sværhedsgraden af ​​kliniske forløb af sygdom); ♦ moderat leukocytreaktion (10-15 leukocytter i synsfelt) til en udtalt (30-50 eller flere leukocytter i synsfeltet); ♦ det totale antal mikroorganismer er moderat eller stort;

    ♦ Morpotyper af lactobacilli dominerer, gærceller er til stede, fragmenter af pseudomycelium med blastosporer.

  • Kulturmetode: ♦ Det totale antal mikroorganismer overstiger ikke 8 lg CFU / ml; ♦ Gærsvampe er til stede i en titer på mere end 4 lg CFU / ml;

    ♦ Lactobacilli er sået i en titer på mere end 6 lg CFU / ml.

    Fig. 6-5. Candida vaginitis (smearmikroskopi. Gramfarvet).

    Kombinationen af ​​bakteriel vaginose og candidal vaginitis.

    • Mikroskopisk smøre farves Gram (Fig 6-6).: ♦ vaginale epitel overvejende overfladelag er til stede "nøgle" epitelceller; ♦ moderat eller svær leukocytreaktion; ♦ samlede antal mikroorganismer eller store massive; ♦ domineret morfotyper strenge anaerobe og Gardnerella gærceller og / eller fragmenter af svampens pseudomycelium er til stede;

    ♦ Laktomorfotyper er fraværende, eller enkelte er synlige.

  • Kulturmetode: ♦ Det totale antal mikroorganismer er massiv (mere end 9 lg CFU / ml), men når dyrkningen kun sker under aerobe betingelser, øges kun gærlignende svampe i moderate eller høje titre (4-7 lg CFU / ml) ♦ der er ingen vækst af lactobaciller eller deres lavt titer (mindre end 4 lg CFU / ml);

    ♦ mikroorganismer dominerende i plantning - bakterier, Prevollae, Gardnerella, anaerobic cocci.

    Fig. 6-6. En kombination af bakteriel vaginose og candidal vaginitis (Gram smear microscopy).

    Asymptomatisk transport af svampe.

    • Mikroskopi af et gramfarvet smed: ♦ Det vaginale epitel er overvejende repræsenteret ved overfladerne af cellerne ♦ Leukocytreaktionen udtrykkes ikke, individuelle leukocytter i syne ♦ Det totale antal mikroorganismer er moderat eller stort.

    ♦ Morphotyper af lactobacilli dominerer, svampe opdager oftest ikke eller findes i sjældne synsfelt, enkeltgærceller.

  • Kulturmetode: ♦ Det samlede antal mikroorganismer overstiger ikke 8 lg CFU / ml;

    IKKE-SPECIFIKKE VAGINITIS

    Mikroskopisk smear Gram farves (Figur 6-7.): ♦ vaginale epitel indeholder de overfladiske og intermediære celler i de inflammatoriske proces opfylder parabasale celler; ♦ udtrykt i varierende grad leukocytreaktion (mere end 10 leukocytter pr synsfelt); ♦ samlede mikroorganismer er moderate; ♦ der er ingen lactobaciller eller deres antal reduceres kraftigt (for nogle få i synsfeltet);

    ♦ mormotyper af UPM dominerer - coliformsticks eller gram-positive cocci.

    Kulturmetode: ♦ Manglende vækst af lactobaciller eller deres mindste mængde;

    • vækst af valgfri aerobe UPM, oftest en type i høj billedtekst.

    Fig. 6-7. Ikke-specifik vaginitis (smearmikroskopi, Gram-farvet).

    INTERMEDIATE OPTION AF MICROCENOSIS
    • Mikroskopisk smear farvet med Gram-farvning: ♦ indeholder vaginale epitel overfladiske celler kan opfylde single "nøgle" celler ilinablyudat tilbøjelighed til deres dannelse; ♦ leukocyttal højst 10 synsfelt ♦ samlede antal af mikroorganismer moderate eller store;

    ♦ Morphotyper af strenge anaerober og gardnerella kombineret med moderat reduceret titer af lactobacilli dominerer.

  • Kulturmetode: ♦ Det totale antal mikroorganismer er 6-8 lg CFU / ml; ♦ Titerne af lactobaciller er reduceret, men det kan nå moderate værdier (5-6 lg CFU / ml);

    ♦ moderat titer af obligatoriske anaerober og gardnerella (5-7 lg CFU / ml).

    CYTOLYTISK VAGINOS
    • Mikroskopi af et Gram-farvet smear (Fig. 6-8): ♦ Det overvældende flertal af epithelceller er cytolyse; elementer i celledestination - detritus, eksponerede kerner af overflade- og mellemproduktceller råder over et smear; ♦ leukocytter er fraværende eller deres antal ikke overstiger 10 i synet

    ♦ store mængder mikroflora, repræsenteret ved typiske lactobacillus morphotyper.

  • Kulturmetode: ♦ Kun rigelig vækst af lactobaciller;

    ♦ Samtidig mikroflora er normalt fraværende.

    Fig. 6-8. Cytolytisk vaginose (Gram smear mikroskopi).

    VAGINAL EPITELIAL ATROPHY
    • (. Figur 6-9) mikroskopisk smøre farves Gram: ♦ afhængigt af graden af ​​atrofi af den vaginale slimhinde epitel indeholder forskellige forhold af antallet af mellemliggende og parabasale celler, med væksten af ​​atrofi forøger antallet af parabasale og basale celler; ♦ leukocyttal er typisk mindre end 10 i syne

    ♦ mikroflora er praktisk taget fraværende single lactomorphotypes eller UPM morphotypes kan findes i sjældne synsfelter.

  • Kulturmetode: ♦ Lav total mikrobiell kontaminering (2-4 lg CFU / ml);

    ♦ lave titere af både lactobaciller og UPM.

    Fig. 6-9. Vaginal epithelial atrofi (smear mikroskopi, Gram-farvet).

    EVALUERING AF RESULTATERNE AF MIKROBIOLOGISK FORSKNING AF BLODEN

    Ved isolering af typiske patogener (Staphylococcus aureus, Listeria, Klebsiella, andre coliforme bakterier, Pseudomonas bacillus) samt svampe er endog en positiv hæmekultur af diagnostisk værdi. Når isolering af mikroorganismer, der genkendes som hudsaprofytter (koagulase-negative stafylokokker, difteroider, mikrokasser), kræves to positive blodkulturer for at bekræfte ægte bakteriæmi.

    VURDERING AF RESULTATER AF MIKROBIOLOGISK STUDIE AF URIN

    Graden af ​​bakteriuri er hovedkriteriet i differentieringen af ​​en infektiøs proces i urinvejen fra kontaminering af urin med normal mikroflora. Graden af ​​bakteriuri, der ikke overstiger 3 lg CFU / ml, er normalt resultatet af forurening. Graden af ​​bakteriuri 3-4 lg CFU / ml betragtes som et tvivlsomt resultat, og undersøgelsen skal gentages. Graden af ​​bakteriuri, der er lig med og højere end 5 lg CFU / ml, indikerer tilstedeværelsen af ​​en inflammatorisk proces. Det er imidlertid nødvendigt at tage hensyn til de særlige forhold i sygdommens kliniske manifestationer og den behandling, der udføres (ikke kun antibakterielt). For eksempel, med en dårlig passage af urin, med dens lave relative densitet, ved pH er den fundet i urinen hos raske mennesker. Monokultur er mere almindelig ved akutte inflammatoriske processer, og den kombineres med en høj grad af bakteriuri. Foreninger af mikroorganismer er mere almindelige i kroniske processer. Ved den endelige evaluering af resultaterne af mikrobiologisk undersøgelse af urin er det nødvendigt at tage hensyn til dataene fra det kliniske billede og andre laboratorieundersøgelser.

    FAKTORER AFFØLGENDE RESULTATET

    Pålideligheden af ​​mikrobiologisk diagnostik afhænger primært af lægeens klinikers overholdelse af reglerne for at tage patologisk materiale til forskning og brugen af ​​oplysninger om patientens tilstand, der undersøges, da valget af mikrobiologisk forskningstaktik og fortolkningen af ​​resultaterne afhænger af disse data. Følgende krav skal overholdes ved indtagelse og transport af biomaterialer til mikrobiologisk undersøgelse:

    ● tage materiale fra stedet for infektion (hvor patogenet er beliggende i det maksimale antal), og når det er umuligt at opfylde dette krav, idet bioassays forbundet med foci af infektion (urin i nyrepatologi og blære udledning fra livmoderkanalen når endometritis); ● udflåd fra skeden, cervikal kanal, urinrør taget før manuel vaginal undersøgelse; sørg for, at patienten ikke har brugt lokal behandling i mindst de sidste 3 dage ● tag materialet inden starten af ​​antimikrobiel terapi, og hvis det er umuligt at opfylde dette krav umiddelbart før den næste dosis af lægemidlet (når koncentrationen bliver minimal) ● følg reglerne for asepsis, dvs. undgå forurening af taget prøve ledsagende forbigående mikroflora; ● anvendes til prøveudtagning af steril bomuld (dacron) podninger og transportmedium (udledning vagina, cervixkanalen, viklet udledning), containere (urin, afføring), sprøjter (pus, ekssudat), hætteglas næringsmedier til blodkultur; Til hurtig diagnosticering af virale infektioner anvendes tamponpensler, hvorfra biomaterialet overføres på en glasskinne eller placeres i specielle transportmedier ● transporteres det materiale, der er taget til laboratoriet i en passende temperaturmodus (20-37 ° C) så hurtigt som muligt (ikke mere end 1-1, 5 timer); hvis det er umuligt at overholde dette krav, brug transportmedier og opbevar prøver i et køleskab (undtagen væske og blod) ● hvis anaerob infektion mistænkes, skal materialet så vidt muligt beskyttes mod ilt; umiddelbart efter indtagning anbringes i anaerobe beholdere eller i specielle transportmedier

    ● i tilfælde af mistænkt gonorræinfektion, er det foretrukket at lede udsåning af materiale taget med en steril plastiksløjfe på et tæt selektivt medium; Derefter placeres petriskålen med såning i en særlig plastpose med et højt indhold af kuldioxid og sendes til laboratoriet.

    Blandt de faktorer, der påvirker pålideligheden af ​​mikrobiologisk diagnose, kan identificeres:

    ● betingelser for at tage og transportere biologisk materiale ● tilstrækkeligt udvalg af mikrobiologiske forskningsmetoder ● faglige kvalifikationer hos mikrobiologer;

    ● Nyttigheden af ​​oplysninger om patientens tilstand, der undersøges, hvilket er vigtigt med hensyn til evaluering af de opnåede resultater.

    Det er nødvendigt at konstant holde kontakten med laboratoriet, foretage fælles diskussioner mellem klinikere og mikrobiologer for hurtig fjernelse af krav og spørgsmål til hinanden, periodisk analysere, evaluere arbejde for at forbedre det.